24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 4782  |  回复: 14

lct515

新虫 (著名写手)

[求助] pnpp法测定脂肪酶问题

我用的p-NPP(对硝基苯棕榈酸酯)法测脂肪酶活性,1mmol/L p-NPP的配置方法是:先0.0378g p-NPP再加入1mL曲拉通-100与5mL异丙醇再用Tris-HCl(pH8.0)定容至100mL。

    测定酶的活性时:取1.5mL 1mmol/L的p-NPP与1.5mLTris-HCl(pH8.0)再加入0.5mL粗酶液10min后再加入8.2mL蒸馏水,对照以0.5mL 90度酶活的粗酶液其他条件相同。紫外410nm处测吸光度。

    但我现在出现问题是:1 灭活的酶液的吸光度比没有灭活的要高 2 配置p-NPP溶液时p-Npp并不完全溶解 3 即使待测酶是标准的脂肪酶10min后也不会发现明显的颜色变化。

    请问是什么原因,谢谢!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lct515

新虫 (著名写手)

自己顶一下~
2楼2011-05-17 16:36:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

10809036

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

lct515(金币+5): 2011-05-18 11:39:05
你好  ,你把p-npp配好后  。乳化一下,就溶解了  我们都是这样。
想要走得快,就单独上路;想要走得远,就结伴同行!!
3楼2011-05-18 11:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lct515

新虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 10809036 at 2011-05-18 11:19:05:
你好  ,你把p-npp配好后  。乳化一下,就溶解了  我们都是这样。

其他的问题你知道是什么原因吗?
4楼2011-05-18 11:38:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

10809036

铜虫 (小有名气)

空白对照你设成是不加酶液的 反应底物,用酶标仪测以后我们的都是正值,因为底物空白为零。你的其他两种情况可能是   酶活太低,造成颜色不是很明显
想要走得快,就单独上路;想要走得远,就结伴同行!!
5楼2011-05-18 14:38:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xym2007

银虫 (小有名气)

人工底物本身在碱性条件下就会有自发水解
6楼2011-07-21 16:45:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yang770218

新虫 (初入文坛)

pnpp应该是很容易水解的,听你的说法好像没有反应哟
7楼2012-07-04 14:21:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yang770218

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1567551楼: Originally posted by yang770218 at 2012-07-04 14:21:55
pnpp应该是很容易水解的,听你的说法好像没有反应哟

pnpp应该是很容易水解的,听你的说法好像没有反应哟http://www.maxchemtech.com/
http://www.maxchemtech.com.cn
8楼2012-07-04 14:22:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

heng5719

新虫 (初入文坛)

pnpp法测脂肪酶酶活,pnpp溶液每次都必须现配吗?
9楼2012-12-24 18:16:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wenze2019

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 10809036 at 2011-05-18 11:19:05
你好  ,你把p-npp配好后  。乳化一下,就溶解了  我们都是这样。

你好 我们课题组是将p-npp溶解在乙醇里 但是溶解度一直不好 请问你说的乳化一下是什么意思啊 是用乳化仪吗?
10楼2013-10-16 19:38:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lct515 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 计算机类求调剂,22408-274分 +5 上岸de小虫 2026-04-09 6/300 2026-04-09 20:48 by xujun0624
[考研] 269求调剂 +9 啊啊我我 2026-04-07 9/450 2026-04-09 20:17 by 小瑶楠南
[考研] 284求调剂 +8 让我上岸吧阿西 2026-04-09 10/500 2026-04-09 18:34 by 段伟艳
[考研] 求调剂希望还是希望在山河四省附近 +3 快乐的小白鸽 2026-04-05 3/150 2026-04-09 17:36 by wp06
[硕博家园] 新一代电子信息294求调剂 不挑学校 +5 Ytyt11 2026-04-09 6/300 2026-04-09 14:40 by Ytyt11
[考研] 302分求调剂 +4 凡语祈愿 2026-04-08 5/250 2026-04-08 22:03 by 土木硕士招生
[考研] 266求调剂 +5 08电气工程 2026-04-03 5/250 2026-04-08 20:22 by 逆水乘风
[考研] 316求调剂 +4 15318418673 2026-04-07 4/200 2026-04-07 22:12 by hemengdong
[考研] 301求调剂 +18 121. 2026-04-04 18/900 2026-04-07 17:49 by 蓝云思雨
[考研] 286求调剂 +20 Faune 2026-04-06 20/1000 2026-04-07 11:33 by 诗与自由
[考研] 信工所11408 340分 本科西安交大自动化 +3 moontrek 2026-04-06 3/150 2026-04-07 09:56 by chongya
[考研] 0855求调剂材料 +11 红桃灼灼 2026-04-04 12/600 2026-04-06 10:26 by 蓝云思雨
[考研] 材料专硕283求调剂 +17 试试看呗 2026-04-04 18/900 2026-04-06 09:24 by 286640313
[考研] 一志愿哈尔滨工业大学085600英一数二337分求调剂 +12 lyz0427 2026-04-03 12/600 2026-04-06 06:37 by houyaoxu
[考研] 296求调剂 +3 汪!?! 2026-04-05 4/200 2026-04-05 20:13 by 啵啵啵0119
[考研] 085602调剂 初试总分335 +12 19123253302 2026-04-04 12/600 2026-04-05 08:08 by 544594351
[考研] 一志愿重庆大学085404,总分314分,求调剂 +4 zf83hn 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:25 by 啵啵啵0119
[考研] 调剂 +5 asdasdassda 2026-04-03 6/300 2026-04-03 20:27 by 岸上的一条鱼
[考研] 考研调剂 +3 Draa 2026-04-03 3/150 2026-04-03 17:37 by hgwz7468
[考研] 315求调剂 +6 顺理成张 2026-04-03 8/400 2026-04-03 14:04 by 百灵童888
信息提示
请填处理意见