24小时热门版块排行榜    

查看: 5300  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lct515

新虫 (著名写手)

[求助] pnpp法测定脂肪酶问题

我用的p-NPP(对硝基苯棕榈酸酯)法测脂肪酶活性,1mmol/L p-NPP的配置方法是:先0.0378g p-NPP再加入1mL曲拉通-100与5mL异丙醇再用Tris-HCl(pH8.0)定容至100mL。

    测定酶的活性时:取1.5mL 1mmol/L的p-NPP与1.5mLTris-HCl(pH8.0)再加入0.5mL粗酶液10min后再加入8.2mL蒸馏水,对照以0.5mL 90度酶活的粗酶液其他条件相同。紫外410nm处测吸光度。

    但我现在出现问题是:1 灭活的酶液的吸光度比没有灭活的要高 2 配置p-NPP溶液时p-Npp并不完全溶解 3 即使待测酶是标准的脂肪酶10min后也不会发现明显的颜色变化。

    请问是什么原因,谢谢!!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

10809036

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

lct515(金币+5): 2011-05-18 11:39:05
你好  ,你把p-npp配好后  。乳化一下,就溶解了  我们都是这样。
想要走得快,就单独上路;想要走得远,就结伴同行!!
3楼2011-05-18 11:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

lct515

新虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by 10809036 at 2011-05-18 11:19:05:
你好  ,你把p-npp配好后  。乳化一下,就溶解了  我们都是这样。

其他的问题你知道是什么原因吗?
4楼2011-05-18 11:38:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

10809036

铜虫 (小有名气)

空白对照你设成是不加酶液的 反应底物,用酶标仪测以后我们的都是正值,因为底物空白为零。你的其他两种情况可能是   酶活太低,造成颜色不是很明显
想要走得快,就单独上路;想要走得远,就结伴同行!!
5楼2011-05-18 14:38:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xym2007

银虫 (小有名气)

人工底物本身在碱性条件下就会有自发水解
6楼2011-07-21 16:45:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 基金啊基金 +3 longfie172 2026-08-20 3/150 2026-08-21 00:04 by wuchongjun
[基金申请] 科研孤儿太难了 +14 我4大白菜 2026-08-20 15/750 2026-08-20 22:33 by 袁向阳007
[基金申请] 让我中一个面上吧! +8 大萍1987 2026-08-20 10/500 2026-08-20 21:48 by 大萍1987
[基金申请] 言之凿凿,明天官网会通知放榜? +15 医学老男孩 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:35 by CaoLG
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +21 yaoyewhu2008 2026-08-20 22/1100 2026-08-20 17:03 by yaoyewhu2008
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+3 snowwithsea 2026-08-19 12/600 2026-08-20 15:56 by lfy8008
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +10 wangze12014 2026-08-14 12/600 2026-08-19 16:56 by 苦难博士
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见