| 查看: 3571 | 回复: 18 | |||||
小沐虫金虫 (初入文坛)
|
[求助]
急求 植物CAT酶活的测定方法 ！！！
|
||||
| 最近，在做水稻叶片CAT酶活的测定，怎么都测不出来。我是用缓冲液PBS7.0做空白调零，反应液是用0.1M的30%的过氧化氢和0.1M的PBS7.0按1:4混匀，用2.5ml的反应液加酶液50ul到于比色皿中，在240nm下进行测定，结果竟为0.000 ~~不知道为什么？急求大家指点下~~非常感谢~~· |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 生工检测理论与实务 | 实验求助 | 抗氧化酶活性测定 |
» 猜你喜欢
江苏省优青门槛
已经有20人回复
-
心好累。今年我们部门提交了18个项目。中了11了，可惜我的又挂了
已经有10人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有184人回复
-
面上项目计划书
已经有7人回复
-
面上项目计划书附件
已经有9人回复
-
面上项目计划书系统状态
已经有18人回复
-
NSFC-UNEP（与联合国环境规划署）合作项目
已经有33人回复
-
和伊朗人合作
已经有32人回复
-
江苏省自然基金
已经有7人回复
-
生命科学新英文普刊《INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE》
已经有9人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- CAT POD SOD测定中提取液的问题
已经有14人回复
- 植物CAT活性测定结果的计算方法
已经有15人回复
- 三种木质素降解酶酶活测定方法探讨
已经有8人回复
- 植物山茶过氧化氢酶（CAT）活性测定问题
已经有24人回复
- 关于几种抗氧化酶活性（CAT POD）测定的问题~
已经有17人回复
- 植物CAT测定问题
已经有5人回复
- 测定植物酶类（POD、CAT、APX），问题请教
已经有10人回复
- 过氧化氢酶CAT的测定问题
已经有12人回复
- 糖代谢 酶活试剂盒
已经有5人回复
- 需要测酶活去外地采样怎么保存植物样品
已经有21人回复
- 求SOD，POD和CAT的测定方法
已经有26人回复
- 植物PAL及CAT两种酶测定中遇到的问题
已经有13人回复
- 关于测定植物CAT的问题
已经有19人回复
- 测CAT酶活，急求指导~~~大家帮帮忙吧，感激不尽~~~~
已经有13人回复
- 请问有没有大侠知道真菌漆酶酶活的测定方法，感激不尽
已经有4人回复
- 急求！！植物叶片中硝酸还原酶、谷酰胺合成酶、天门冬酰胺合成酶活性的测定方法
已经有10人回复
- 【求助/交流】葡萄糖氧化酶酶活的测定方法
已经有17人回复
- 【求助/交流】关于POD、SOD、CAT三种酶在玉米或其他植物体内的作用
已经有13人回复
- 【求助】超氧化物歧化酶活性测定方法
已经有5人回复
starseacow
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +426 - APEPI: 64
- 应助: 1217 (讲师)
- 金币: 9097.3
- 散金: 16445
- 红花: 226
- 帖子: 4669
- 在线: 2320.2小时
- 虫号: 1136974
- 注册: 2010-11-02
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
- 管辖: 动植物
【答案】应助回帖
|
看到楼主在其他帖子里求助CAT检测方法，可以参考这个 Misako Kato, Seki Shimizu. Chlorophyll metabolism in higher plants. VII. Chlorophyll degradation in senescing tobacco leaves; phenolic-dependent peroxidative degradation. Canadian Journal of Botany, 1987, 65(4): 729-735, 10.1139/b87-097 Catalase activity was assayed by measuring the initial rate of disappearance of H202. Three millilitres of reaction mixture contained 0.1 M sodium phosphate buffer, pH 7.0, 2 mM H20,, and 0.1 mL enzyme extract. The decrease in H,O, was followed as a decline in optical density at 240 nm and activity was calculated using the extinction coefficient (40.0 mM" cm-' at 240 nm) for H,O, |
3楼2013-06-20 21:50:00
starseacow
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +426 - APEPI: 64
- 应助: 1217 (讲师)
- 金币: 9097.3
- 散金: 16445
- 红花: 226
- 帖子: 4669
- 在线: 2320.2小时
- 虫号: 1136974
- 注册: 2010-11-02
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
- 管辖: 动植物
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小沐虫: 金币+6 2013-06-22 14:28:49
感谢参与，应助指数 +1
小沐虫: 金币+6 2013-06-22 14:28:49
|
CAT测定是比较简单的实验，你的方法基本上没什么问题，可以从这几个方面检查： 1 分光光度计是否工作正常？楼主的检测试剂有没有问题？H2O2常温长时间放置很容易失效，0.1M H2O2最好用新鲜试剂临用前配置。 2 你添加的样品量是否足够？在酶提取时，一般可以用0.5 g植物材料在5 ml缓冲液中研磨提取。不知楼主用的是多少？为了验证提取和样品量，检测体系都正常，楼主可以试试做预实验，比如加2 ml H2O2，2 ml提取缓冲液，2 ml提取样品混合，看看240 nm下是否存在吸光度变化。 |
2楼2013-06-20 21:46:53
匿名
用户注销 (正式写手)
千年老妖
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 1268.9
- 散金: 15
- 红花: 9
- 沙发: 1
- 帖子: 627
- 在线: 58.7小时
- 虫号: 0
- 注册: 2012-06-11
- 性别: MM
- 专业: 实验动物学
4楼2013-06-21 12:57:39
小沐虫
金虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1517.5
- 红花: 1
- 帖子: 45
- 在线: 33.7小时
- 虫号: 1900294
- 注册: 2012-07-19
- 性别: MM
- 专业: 农业昆虫学
5楼2013-06-22 14:38:36
小沐虫
金虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1517.5
- 红花: 1
- 帖子: 45
- 在线: 33.7小时
- 虫号: 1900294
- 注册: 2012-07-19
- 性别: MM
- 专业: 农业昆虫学
6楼2013-06-22 14:45:50
小沐虫
金虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1517.5
- 红花: 1
- 帖子: 45
- 在线: 33.7小时
- 虫号: 1900294
- 注册: 2012-07-19
- 性别: MM
- 专业: 农业昆虫学
7楼2013-06-22 14:52:31
小沐虫8楼2013-08-12 11:01:19
小沐虫
金虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1517.5
- 红花: 1
- 帖子: 45
- 在线: 33.7小时
- 虫号: 1900294
- 注册: 2012-07-19
- 性别: MM
- 专业: 农业昆虫学
9楼2013-08-17 10:16:49
小沐虫
金虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1517.5
- 红花: 1
- 帖子: 45
- 在线: 33.7小时
- 虫号: 1900294
- 注册: 2012-07-19
- 性别: MM
- 专业: 农业昆虫学
10楼2013-08-17 21:12:40
