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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 农林 » 植保 » 酶活测定基本问题
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弦上的梦99

金虫 (小有名气)

[求助] 酶活测定基本问题已有1人参与

大神们好！！（1）我想在靶标酶水平上测定一种除草剂对杂草的活性。虽然还没有用整株生测法来确定敏感与抗性，但是我提前已经知道了哪个种群是敏感的，哪个种群是抗的（因为我开始实验之前老师已经筛选过几次了），请问我可不可以先直接用这两个种群为材料才测定酶活？还是要等喷药过后再以这两个种群为材料来测定呢？因为我想的是，如果在喷药之前直接测的话，会不会因为没有喷药而导致靶标酶活性没有变化呢？靶标酶活性的变化需不需要喷药后的除草剂来诱导啊？？请指教！！！
                     （2）另外，抗性种群中代谢酶活性增强是不是也要除草剂来诱导呢？还是没有喷除草剂的情况下，抗性种群中的代谢酶活性本来就很强？？
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1楼2014-05-15 10:23:25
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xiuwei001

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
木虫/panda: 金币+3, 感谢应助，欢迎常来农林版 2014-05-29 22:52:34
第一个问题，既然知道了敏感和抗性了，可以直接测定二者靶标酶的米氏方程，km和vmax，比较酶促动力学参数，看看有没有差异（这个差异不好说，看你是什么靶标了，这个酶是不是至关重要的。个人感觉差异应该不会太大，因为没有药物诱导）。所以还是低剂量处理几天再测定吧。
第二个问题依然和酶有关系，可能是增强的，也可能没有差异。一切要看你的靶标酶。
个人认为（不一定对），如果是基因变化引起的可遗传抗性，靶标酶不用诱导直接测定就能看出差异；
但如果是你的抗性机理不是基因变化，而且其他的，可能不诱导就看不出差异。
还有生物体的每个酶都需要能量来合成，除了维持生命至关重要的酶需要经常合成，其他不重要的酶是随用随合成的，也就是说有胁迫了才能表达。
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2楼2014-05-29 21:56:17
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弦上的梦99

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiuwei001 at 2014-05-29 21:56:17
第一个问题，既然知道了敏感和抗性了，可以直接测定二者靶标酶的米氏方程，km和vmax，比较酶促动力学参数，看看有没有差异（这个差异不好说，看你是什么靶标了，这个酶是不是至关重要的。个人感觉差异应该不会太大， ...

哦哦 这样啊。那我可以在喷除草剂之前测定靶标酶的离体酶活吧？
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3楼2014-05-30 14:19:51
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xiuwei001

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可以啊
而且最好是做一下，这样才能说明问题
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4楼2014-05-30 17:27:13
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弦上的梦99

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiuwei001 at 2014-05-30 17:27:13
可以啊
而且最好是做一下，这样才能说明问题

好的，谢谢你~~
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5楼2014-05-31 09:43:31
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