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小彩84

新虫 (初入文坛)

[求助] 福林酚法测定蛋白酶活力出现问题了

用福林酚法测定发酵液中蛋白酶活力,从40度水浴中直接拿出来就去测紫外了,遇到了下面的问题:
1  溶液倒进比色皿后,比色皿壁上有很多小气泡,且不易消失。
2  吸光度一直变化
是我没等到溶液冷了再测的原因,还是生成的钼蓝与钨蓝不稳定?
做过此方面实验的虫友过来交流一下,实验中需要注意些什么?是不是要等到溶液冷了再测紫外,大家都怎么冷却?

酶活测定方法
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小彩84

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lzgxgz at 2012-01-03 09:39:30:
有气泡是比色皿不洁造成,以洗液浸泡一会洗净即可。
我以前以自来水冲洗冷却,不过你的标准没写冷却,估计影响不大,不会是气泡影响的吧?

今天做了温度实验,吸光度变化与温度和气泡有关,放冷后的吸光度很稳定
3楼2012-01-03 22:12:39
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
小彩84(金币+2): 有帮助 谢谢哦 2012-01-03 22:10:18
有气泡是比色皿不洁造成,以洗液浸泡一会洗净即可。
我以前以自来水冲洗冷却,不过你的标准没写冷却,估计影响不大,不会是气泡影响的吧?
2楼2012-01-03 09:39:30
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

★ ★ ★ ★
看天(金币+4): 鼓励 常来 2012-01-23 13:39:48
在测定淀粉酶活力的时候出现过类似情况,因为吸光度的测定是光线射过样品测定被吸收多少,光线透过气泡的时候会被吸收和折射,造成吸光值错误,所以请保持无气泡。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2012-01-22 16:22:22
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落满夏天

银虫 (正式写手)

有气泡肯定会影响吸收。我觉得你最好是把温度降下来。
星星之火,可以燎原
5楼2012-01-29 15:41:29
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小彩84

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-01-22 16:22:22:
在测定淀粉酶活力的时候出现过类似情况,因为吸光度的测定是光线射过样品测定被吸收多少,光线透过气泡的时候会被吸收和折射,造成吸光值错误,所以请保持无气泡。

你的淀粉酶活是如何测定的?测得是什么里的淀粉酶活?
6楼2012-04-10 21:40:10
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xiaoer0330

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 小彩84 at 2012-04-10 21:40:10
你的淀粉酶活是如何测定的?测得是什么里的淀粉酶活?...

楼主 我想问一下 这个测酶活的方法 最后稳定了没? 因为我现在也遇到了同样的问题 今天想做一下温度的实验
7楼2013-04-11 09:46:19
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lyclqlyclq

新虫 (初入文坛)

请问一下楼主 做这个实验的标准曲线吸光常数K值一定要在95~100之间么
8楼2013-05-30 15:36:58
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GXKstone

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
为什么只用碳酸钠,而不是Folin酚的甲液?
9楼2016-08-14 09:47:22
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蓝染hyl

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by GXKstone at 2016-08-14 09:47:22
为什么只用碳酸钠,而不是Folin酚的甲液?

想问下福林酚的甲液是什么呀?不是直接用商业买的福林酚就好了嘛?
10楼2017-10-28 09:16:31
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