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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 福林酚法测定蛋白酶活力出现问题了
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小彩84

新虫 (初入文坛)

[求助] 福林酚法测定蛋白酶活力出现问题了

用福林酚法测定发酵液中蛋白酶活力，从40度水浴中直接拿出来就去测紫外了，遇到了下面的问题：
1  溶液倒进比色皿后，比色皿壁上有很多小气泡，且不易消失。
2  吸光度一直变化
是我没等到溶液冷了再测的原因，还是生成的钼蓝与钨蓝不稳定？
做过此方面实验的虫友过来交流一下，实验中需要注意些什么？是不是要等到溶液冷了再测紫外，大家都怎么冷却？

酶活测定方法
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GXKstone

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1楼 2012-01-02 22:37:47
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

小彩84

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lzgxgz at 2012-01-03 09:39:30:
有气泡是比色皿不洁造成，以洗液浸泡一会洗净即可。
我以前以自来水冲洗冷却，不过你的标准没写冷却，估计影响不大，不会是气泡影响的吧？

今天做了温度实验，吸光度变化与温度和气泡有关，放冷后的吸光度很稳定
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3楼2012-01-03 22:12:39
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lzgxgz

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
小彩84(金币+2): ★有帮助 谢谢哦 2012-01-03 22:10:18
有气泡是比色皿不洁造成，以洗液浸泡一会洗净即可。
我以前以自来水冲洗冷却，不过你的标准没写冷却，估计影响不大，不会是气泡影响的吧？
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2楼2012-01-03 09:39:30
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★ ★ ★ ★
看天(金币+4): 鼓励 常来 2012-01-23 13:39:48
在测定淀粉酶活力的时候出现过类似情况，因为吸光度的测定是光线射过样品测定被吸收多少，光线透过气泡的时候会被吸收和折射，造成吸光值错误，所以请保持无气泡。
赞一下(1人) 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2012-01-22 16:22:22
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落满夏天

银虫 (正式写手)
有气泡肯定会影响吸收。我觉得你最好是把温度降下来。
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星星之火，可以燎原
5楼2012-01-29 15:41:29
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小彩84

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-01-22 16:22:22:
在测定淀粉酶活力的时候出现过类似情况，因为吸光度的测定是光线射过样品测定被吸收多少，光线透过气泡的时候会被吸收和折射，造成吸光值错误，所以请保持无气泡。

你的淀粉酶活是如何测定的？测得是什么里的淀粉酶活？
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6楼2012-04-10 21:40:10
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xiaoer0330

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小彩84 at 2012-04-10 21:40:10
你的淀粉酶活是如何测定的？测得是什么里的淀粉酶活？...

楼主 我想问一下 这个测酶活的方法 最后稳定了没？ 因为我现在也遇到了同样的问题 今天想做一下温度的实验
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7楼2013-04-11 09:46:19
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lyclqlyclq

新虫 (初入文坛)
请问一下楼主 做这个实验的标准曲线吸光常数K值一定要在95~100之间么
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8楼2013-05-30 15:36:58
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GXKstone

新虫 (初入文坛)
送红花一朵
为什么只用碳酸钠，而不是Folin酚的甲液？
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9楼2016-08-14 09:47:22
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蓝染hyl

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by GXKstone at 2016-08-14 09:47:22
为什么只用碳酸钠，而不是Folin酚的甲液？

想问下福林酚的甲液是什么呀？不是直接用商业买的福林酚就好了嘛？
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10楼2017-10-28 09:16:31
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