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[交流]
【求助/交流】请问做蛋白质消化用考马斯亮蓝法还是福林-酚法检测好？
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我想用胃蛋白酶对蛋白质进行消化，然后检测剩余蛋白质的含量。 想问一下各位虫友用考马斯亮蓝法好还是福林-酚法好？ 蛋白质被消化成的氨基酸会不会对考马斯亮蓝法造成影响？？？ 谢谢大家啊~~~ |
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3楼2011-04-13 10:40:15
4楼2011-04-13 10:51:05
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不是啊 ，福林试剂测的是氨基酸的含量。 中华人民共和国专业标准——蛋白酶活力测定法 “取15×100mm试管3支,编号1、2、3(做2只也可),每管内加入样品（蛋白酶） 稀释液1mL,置于40℃水浴中预热2min,再各加入经同样预热的酪蛋白1mL,精确保温10min, 时间到后,立即再各加入0.4mol三氯乙酸2mL,以终止反应（三氯乙酸使蛋白质变性沉淀）,继续置于水浴中保温20min,使残余蛋白质沉淀后离心或过滤,然后另取15×150mm试管3支,编号1、2、3,每管内加入滤液1mL,再加0.4mol碳酸钠5mL,已稀释的福林试剂1mL,摇匀,40℃保温发色20min后进行光密度值测定。” |
5楼2011-04-13 11:22:59
6楼2011-04-13 11:26:50