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flaming777

金虫 (正式写手)

[交流] 谁做过考马斯亮蓝测定蛋白酶活性的实验啊？？已有4人参与

谁做过考马斯亮蓝测定蛋白酶活性的实验啊？？
一般都是用福林-酚法做的，据说国外现在用考马斯亮蓝代替福林-酚，请问哪位虫友做过相关的实验，请给予指导
还有，我做了一下，用考马斯亮蓝测蛋白酶活性，有的组在595nm处出现负数，请问这是什么原因？

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-17 at 17:16 ]
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1楼2009-06-03 08:45:11
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w.king124

金虫 (正式写手)
CBB好像是测蛋白含量的吧
两种方法测量的范围不同，看你样品蛋白质含量的多少吧
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2楼2009-06-03 10:48:16
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
考马斯亮蓝要求蛋白浓度要在1mg/ml以上吧
还有两者的干扰因素是不一样的
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3楼2009-06-03 10:56:24
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cauzhangtao

木虫 (正式写手)
★
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出现负数，考虑是不是把基础值弄错了。
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4楼2009-06-03 11:06:01
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pal2004

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
负数有可能啊，蛋白酶自身不水解？
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5楼2009-06-03 11:25:09
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j2

木虫 (正式写手)
空白太高了？
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修炼ｉｎｇ，当虫仙……
6楼2009-06-03 12:35:47
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flaming777

金虫 (正式写手)
呵呵，不知道具体原因，因为福林试剂比较难配，液溴什么的还需要回流，所以考虑用考马斯亮蓝
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7楼2009-06-04 07:28:15
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qwj_1001

金虫 (著名写手)
★
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考马斯亮蓝不是测定蛋白含量的吗？？？？？？？？？
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我们来自五湖四海为了一个目标聚集在这里，使我们获得知识。
8楼2009-06-04 07:31:17
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
福林试剂有买的，不用自己配
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9楼2009-06-04 08:27:19
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xukekoy

铜虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
考马斯亮蓝测蛋白含量，对照不能用灭活的酶液，因为考马斯亮蓝与灭活的蛋白也结合，所以会出现负值。
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10楼2009-06-04 09:23:59
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