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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 考马斯亮蓝法测蛋白质含量 染色不均匀 好像没有溶解似地 怎么回事啊？
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gloomy6159

铁杆木虫 (职业作家)

[求助] 考马斯亮蓝法测蛋白质含量 染色不均匀 好像没有溶解似地 怎么回事啊？

ph？
染色剂放置时间不够？
还是它染色本来就要一段时间？
求解啊 谢谢
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1楼 2011-10-27 21:18:01
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-10-29 11:06:23
gloomy6159: 回帖置顶 2011-12-06 14:05:31
换BCA法就没有这种问题了
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-10-28 07:57:48
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eileen8519

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

gloomy6159(金币+10): 是不是与水溶性蛋白不相互溶解呢？ 2011-10-28 08:45:04
考马斯亮蓝没有完全溶解吧，我们用这个测蛋白质的时候，都没出现过这种情况。
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3楼2011-10-28 08:24:34
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xbbsr

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

换bac啦 步骤还少 价格基本差异不大
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4楼2011-10-28 08:47:29
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belinda227

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gloomy6159(金币+10): 充分溶解后过滤？必须做的步骤吗？ 麻烦加我qq 谢谢你 2011-10-28 14:16:59
gloomy6159(金币+1): 我QQ 285662304 2011-10-28 14:18:51
wanhscn(金币+2): Good! 2011-10-29 11:05:17
如果是自己配置的考马斯亮蓝溶液，需要充分溶解后过滤，且只有一个月的有效期，存放时间长了会出现沉淀的。
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5楼2011-10-28 09:22:12
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0逃韬0

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

gloomy6159(金币+10): 没有消化好？不是一个溶解的过程吗？还是说对样品的消化需要一定的时间呢？麻烦加我qq285662304 谢谢 2011-10-28 14:18:18
考马斯亮蓝没消化好
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6楼2011-10-28 12:53:16
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zhoubo432

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助回帖 2011-10-29 11:05:45
考马斯亮蓝检测蛋白质含量好像是不太准确哦。一个染色的时间要长，而且脱色的时间也要长。不过本身还是要看你蛋白质样品量的多少。一般只是用考马斯亮蓝检测是否存在蛋白质，而不是定量。建议定量采用BCA法！！
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临渊羡鱼不如退而结网！！！
7楼2011-10-29 10:39:45
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孟王氏

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 鼓励应助回帖 2011-10-29 11:05:58
gloomy6159(金币+4): 2011-11-05 09:17:30
考马斯亮蓝没有溶好，或者没有过滤
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8楼2011-10-29 10:54:40
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这个可以吗
9楼2011-10-29 12:25:31
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虚灵子

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

不均匀的染色可能是因为染料没有完全穿透凝胶，也许是加入染料的量不足，或者是振荡的不够充分。试着加大染料的量或者在振荡一下。
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10楼2011-10-29 12:31:52
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