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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 福林酚法测总酚含量
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noise_1987

新虫 (初入文坛)

[求助] 福林酚法测总酚含量已有3人参与

现在用福林酚法测试总酚含量。
参考的茶多酚的总酚含量测定，有国家标准的。
配置没食子酸标准溶液（10ug/ ml-50ug/ml），加5ml 稀释10倍的福林酚试剂，4ml浓度为7.5%的碳酸钠，1h后测定。
我做全波长扫描的时候，400到800部分吸收度相当的低，甚至是负数，但是有变化趋势，就算扫到1000nm吸收的峰型也是很平滑的，也比较低。
按照道理国标中的这个浓度测定的话 不该这么低的吸收度。
现在唯一怀疑的问题是不是蒸馏水的问题。因为实验室没有蒸馏水设备，一般液相用水都是买的娃哈哈，实验中的一般用水就拿过滤过的自来水，我是用后者来替代蒸馏水的，是不是里面的有些离子影响实验？
是不是我该用娃哈哈来试一下？
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1楼2012-04-17 17:14:28
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

蓝色de风雪

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
hsd3521: 金币+1, 鼓励交流 2012-05-20 08:08:59
记得刚开始时我也是按gb加福林酚 结果吸光值太小
于是在增大福林酚量后就好多了
建议做工作曲线时按实际浓度算而不是按gb上说的浓度，会好点
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4楼2012-05-18 22:20:01
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masterboyama

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
hsd3521: 金币+1, 鼓励交流 2012-10-24 19:48:43
楼主，问题出在碳酸钠上，你提供的碱性环境不够，你把碳酸钠替换成加入1.5毫升饱和的碳酸钠试试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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13楼2012-10-23 06:50:11
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quliuzhu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得是你的福林酚的问题，你的福林酚试剂是自己配置的还是买的现成的，如果是现成的应该是直接使用的，不用稀释。
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海纳百川有容乃大，壁立千仞无欲则刚
2楼2012-04-17 18:35:05
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蓝色de风雪

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by noise_1987 at 2012-06-06 20:23:57
吸光度的数值较低的话 待测液的浓度也是影响因素，我现在50ug/ml的没食子酸溶液 一毫升，加入10ml容量瓶反映体系，吸光度也能达到0.5以上，就是十分不稳定，1h的时候取出来测定后把比色皿里的溶液倒回容量瓶，摇匀 ...

碳酸钠浓度和加入量，注意下这个
50ml容量瓶显色，在没食子酸达到10ppm以下选国药的福林酚1.5ml就可以了，我的结果是这样
大体是1ppm没食子酸对应0.1ml福林酚
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6楼2012-06-07 13:15:30
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蓝色de风雪

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
hsd3521: 金币+1, 应助指数+1, 感谢交流，欢迎常来食品版，谢谢 2012-06-09 19:47:26
引用回帖:
7楼: Originally posted by noise_1987 at 2012-06-07 22:54:42
国药的福林酚？我找了好久 都没找到 能不能给个购买途径
附近几个提供试剂的公司都是卖进口分装 要不就是国产的一些牌子。...

我也是通过试剂公司购买的
http://www.reagent.com.cn/productsinfo.asp?id=73104861
这是他们的网址
试剂公司一瓶加了80，没办法啊
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8楼2012-06-08 00:46:00
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liangxingqiu

金虫 (正式写手)
你好！我现在也在测总酚，但做三个平行试验，三、三个平行实验的吸光度值都差别很大，你们有没有出现这种情况呢？郁闷啊，做了N次都是这样的结果，求指教啊！
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11楼2012-10-22 13:33:02
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-10-24 19:48:12
我做的是0.5ml样品（标准曲线）+ 1ml 10% FC试剂 +2 ml 20%的碳酸钠，妥妥的
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12楼2012-10-22 21:22:57
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masterboyama

铁虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

hsd3521: 应助指数+1 2012-10-24 19:48:33
楼上那位说重复性不好的同学，你可能是没有涡旋混匀

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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14楼2012-10-23 06:53:43
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蓝色de风雪

至尊木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
17楼: Originally posted by 晴梦惬cool at 2013-06-04 10:21:04
你好，网上好多福林酚试剂介绍的时候都说是适用于测蛋白，这个可以测总酚吗？...

当时我就是参照GB8313测的酚 只是不想自己配福林酚所以买的成品
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18楼2013-06-04 12:29:40
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浪仙7639

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我感觉是你的福林酚有问题，这个一定要稀释的，不稀的话吸光度太高是做不出来的，福林酚是生化试剂要低温存放，常温很容易变质的。国标是没有问题的，有的试剂供应商做的也是不好，没准你买来就变质了。
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21楼2014-05-12 19:40:39
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普通回帖

noise_1987

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by quliuzhu at 2012-04-17 18:35:05:
我觉得是你的福林酚的问题，你的福林酚试剂是自己配置的还是买的现成的，如果是现成的应该是直接使用的，不用稀释。

福林酚是买的现成的，酸度为1N，国标中茶多酚用的就是这个（购买的时候客服说咨询过茶叶标准制定的研究所，当时制定标准用的就是这个酸度的），是稀释10倍做的，一些国外文献也是要稀释的。
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3楼2012-04-17 20:23:11
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noise_1987

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 蓝色de风雪 at 2012-05-18 22:20:01
记得刚开始时我也是按gb加福林酚 结果吸光值太小
于是在增大福林酚量后就好多了
建议做工作曲线时按实际浓度算而不是按gb上说的浓度，会好点

吸光度的数值较低的话 待测液的浓度也是影响因素，我现在50ug/ml的没食子酸溶液 一毫升，加入10ml容量瓶反映体系，吸光度也能达到0.5以上，就是十分不稳定，1h的时候取出来测定后把比色皿里的溶液倒回容量瓶，摇匀后立马倒进比色皿再测，吸光度都有0.03甚至更高的差别，我的的确确是摇匀了。就是不知道怎么回事。

福林酚的用量需要进行实验得出，应该有个最适的量。
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5楼2012-06-06 20:23:57
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noise_1987

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 蓝色de风雪 at 2012-06-07 13:15:30
碳酸钠浓度和加入量，注意下这个
50ml容量瓶显色，在没食子酸达到10ppm以下选国药的福林酚1.5ml就可以了，我的结果是这样
大体是1ppm没食子酸对应0.1ml福林酚...

国药的福林酚？我找了好久 都没找到 能不能给个购买途径
附近几个提供试剂的公司都是卖进口分装 要不就是国产的一些牌子。
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7楼2012-06-07 22:54:42
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noise_1987

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 蓝色de风雪 at 2012-06-08 00:46:00
我也是通过试剂公司购买的
http://www.reagent.com.cn/productsinfo.asp?id=73104861
这是他们的网址
试剂公司一瓶加了80，没办法啊...

谢谢。我看一下 我自己买的125m给我都块折腾完了。
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9楼2012-06-08 23:01:05
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yilisha_1988

新虫 (初入文坛)
麻烦问一下，测多酚的时候，还原糖对结果的影响大不大？
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一粒沙的思念
10楼2012-10-16 21:00:56
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