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onkelhero

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】做了western为啥还做考马斯亮蓝？ 已有10人参与

今天看了个文献，做了western之后还做了考马斯亮蓝，为什么？
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1楼 2010-05-17 16:52:28
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mxx86

金虫 (职业作家)

快乐家族--心飞
为什么呢 偶也不知道
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慢慢走过 蓦然回首 才发现大家都走丢了 人生就是这样吗
2楼2010-05-17 19:10:52
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zcqcau

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+5):谢谢分享。 2010-05-18 06:22:55
粗略概述一下：
考马斯亮蓝是为了测蛋白质的浓度是定量的，用数值表示；
western是用来定性（有定量的效果，但不是数值）的；
赞一下(2人) 回复此楼
将有能量帮助他人作为自己的人生追求！
3楼2010-05-17 19:12:43
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):其实，这里面还是有两个概念的。首先确定蛋白的存在和位置（WESTERN），然后再验证其位置和丰度（COMMASSIE ）,换句话说还是斧正。 2010-05-18 06:25:49
考马斯亮蓝是泡胶时候的染料吧，楼上怎么说定量的？
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如果没有人帮助你，那么你就去帮助别人。
4楼2010-05-17 20:18:43
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gene001

金虫 (正式写手)

就是个普通教师
★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+4):谢谢分享。 2010-05-18 06:25:58
考马斯亮蓝是显示你样品里所有蛋白情况的，而western是证明特异蛋白存在的证明实验，两者比较后就可以了解做western的那个蛋白的大概大小等情况，主要是对比后的结果分析！！！
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大家共同交流、共同提高！！！
5楼2010-05-17 23:36:14
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小白兄

金虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-05-18 06:26:10
支持楼上，具体问题具体分析，western是验证带有标签的目的蛋白的。考马斯可以看蛋白浓度和表达量
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时光如流水，匆匆而过。
6楼2010-05-17 23:39:53
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exon2002

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
大家都对，两者都是定性分析，液相蓝染可以定量，但不具特定性。
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7楼2010-05-18 07:25:01
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wulie0411

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
应该是验证转模是否成功，转模的效果如何吧
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8楼2010-05-18 08:43:55
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liyong1981

金虫 (正式写手)
看你转膜的情况，还有多少残留在胶上～
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9楼2010-05-18 13:15:56
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cyjwx123

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般做蛋白我们都是用同样的样品以M为中心一半做考染一半做western，这样做的目的，首先考染可以指示蛋白的存在和蛋白的浓度（蓝色的程度高一般浓度高），而western是用一抗去结合胶上的特异性蛋白，如果在膜上显色出来目的条带，你就可以对应的在考染的位置上找到这个条带，如果这个目的蛋白是未知的，你就可以根据膜上的位置对应考染上的位置将条带切下去打质谱分析。
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看的开才是真本事~
10楼2010-05-18 15:03:11
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