| 查看: 1544 | 回复: 5 | ||
[求助]
借助于ADH酶来测PDC酶活性相关问题
|
| 有没有人测过PDC(丙酮酸羧化酶)的活性，PDC酶能够催化丙酮酸生成乙醛，乙醛能在ADH（乙醇脱氢酶）的作用下生成乙醇，这个途径中NADH转化成NAD，不过ADH是个双向酶，它也能催化乙醇生成乙醛，这个方向NAD转化成NADH。我测PDC活性就是通过在反应体系（MES缓冲液，丙酮酸，NADH，ADH）中加入酶液，看NADH在340下的减少定义PDC的活性，可是在我实验过程中遇到个问题，有些样品加入酶液后NADH没减少反而上升，或者是先上升后下降，这个问题我应该怎么解决，求高手，求解答，谢谢~~ |
回复此楼» 猜你喜欢
化工求调剂！
已经有9人回复
-
301求调剂
已经有13人回复
-
308求调剂
已经有13人回复
-
材料工程310专硕调剂
已经有15人回复
-
304求调剂
已经有9人回复
-
081700，311，求调剂
已经有16人回复
-
080500求调剂
已经有3人回复
-
312求调剂
已经有10人回复
-
070300化学279求调剂
已经有19人回复
-
求调剂 一志愿西南交通大学085701环境工程 282分
已经有9人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- N-末端 氨基酸测序——转膜问题
已经有8人回复
- 硫酸铵沉淀脂肪酶的问题
已经有5人回复
- 真核生物蛋白质相互作用预测软件
已经有8人回复
- 求高人指点《数字摄影测量学》这本书应该怎么学？
已经有7人回复
- 我用AFM测出多层膜的表面粗糙度，这能间接反应界面的粗糙度情况？
已经有14人回复
- 酶活性测定
已经有16人回复
- 急求！！植物叶片中硝酸还原酶、谷酰胺合成酶、天门冬酰胺合成酶活性的测定方法
已经有10人回复
- DNS法测酶活性
已经有4人回复
- 求助文献！关于基因与酶活性中心关系以及酶活性中心测定文献
已经有5人回复
- 【求助】小麦籽粒中蔗糖-淀粉转化过程中关键酶活性测定
已经有19人回复
- 【求助/交流】过氧化物酶活性的测定()
已经有6人回复
- 【讨论】测土壤酶活性时土壤湿度的问题
已经有11人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
看天(金币+3): 鼓励分享 交流 2011-12-21 12:38:32
感谢参与，应助指数 +1
看天(金币+3): 鼓励分享 交流 2011-12-21 12:38:32
|
尝试回答一下： （1）你所测的PDC样品应该不是纯的吧？这样的话，一定要注意PDC样品量要少，占最终反应体系的比例在2%或以下，NAD/NADH可以作为很多酶的底物，你的样品就有可能含有这些干扰酶，减少样品量有助于减少干扰。 （2）ADH酶要过量，比你样品PDC的活性要高出很多才行； （3）丙酮酸底物要过量，NADH要适量（注意初始吸光度在1.5左右最好）。 （4）检测时间要短，超过5min（或更短时间）后的数据就没有意义了。 以前做过相关的，暂时只记得这些，希望对你有所帮助。 |
2楼2011-12-16 13:21:25
3楼2011-12-19 14:59:10
4楼2011-12-19 15:33:16
5楼2011-12-30 11:21:23
6楼2012-03-29 16:33:45
