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韩元富豪

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1529.4
帖子: 137
在线: 37.5小时
虫号: 2786377
注册: 2013-11-08
性别: MM
专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 各位学长、学姐帮帮忙，PCR只有引物二聚体已有11人参与

设计的一对引物，Tm值分别是72℃、67.2℃，尝试的温度有66℃、65℃、64℃、63℃、62℃，但都只有引物二聚体，怎么办，（先前提模板DNA时有条带，但PCR的时候就只有引物二聚体了），已经做了好长时间了，怎么办，求指点

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1楼2014-05-05 11:02:08

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zhaodahe

木虫 (正式写手)

MolEPI: 1
应助: 220 (大学生)
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性别: GG
专业: 微生物遗传学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
韩元富豪: 金币+2, 谢谢啦，我再试试 2014-05-09 13:06:58
韩元富豪: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-05-10 13:12:04

不知道引物多长，但是我觉得退火温度太高了，我一般都用54-56度；60度以上就是很难扩增出来。

8楼2014-05-06 15:13:36

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