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jiebingzh

木虫 (小有名气)

[交流] 是否为引物二聚体 已有7人参与

两种引物,两种mix,几种不同的PCR程序,只有一条是目的条带。在大板的那块胶上边,下边的是引物二聚体吗?

是否为引物二聚体
20140502_mzh-3method.jpg
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dalincn

禁虫 (著名写手)

本帖内容被屏蔽

2楼2014-05-03 08:56:22
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zhaodahe

木虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-05-03 10:42:33
比溴芬兰大,按说引物二聚体不会那么大。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2014-05-03 10:03:10
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zep616745243

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-05-03 10:42:51
一般的引物二聚体在100bp以下,你这个是非特异性条带的可能性较大,升升退火温度
只有不断地失败才会成功
4楼2014-05-03 10:12:22
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meng_xu

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-05-04 14:30:09
看着不像,你引物二聚体不会有这么大,跟你marker最小片段一样大,而且,二聚体,通常应该在溴朌蓝下面,不会差这么远吧
5楼2014-05-04 06:31:01
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xielifenxie

银虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-05-04 14:29:45
这应该是非特异性条带,提高退火温度可以提高特异性
6楼2014-05-04 08:56:30
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幻影望晴

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-05-04 14:29:24
如果你害怕是引物二聚体的话可以试试阴性对照,不加模板其他条件正常,再P一次,如果连阴性对照都出现的话就是引物二聚体,如果没有就是非特异性条带
7楼2014-05-04 11:07:02
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jiebingzh

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by zhaodahe at 2014-05-03 10:03:10
比溴芬兰大,按说引物二聚体不会那么大。

谢谢
8楼2014-05-06 09:41:47
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jiebingzh

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zep616745243 at 2014-05-03 10:12:22
一般的引物二聚体在100bp以下,你这个是非特异性条带的可能性较大,升升退火温度

谢谢再试下
9楼2014-05-06 09:42:03
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jiebingzh

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by meng_xu at 2014-05-04 06:31:01
看着不像,你引物二聚体不会有这么大,跟你marker最小片段一样大,而且,二聚体,通常应该在溴朌蓝下面,不会差这么远吧

谢谢
10楼2014-05-06 09:42:12
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