应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » dna测序没信号
121/2返回列表12下一页
查看: 2544  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

王恺龙2010

铜虫 (初入文坛)

[求助] dna测序没信号

dna测序没信号，怎么解？
是提纯模板，重新设计引物，还是正反向都测一边（目前只在生工侧过两次正向的）？
至于公司给出的建议，克隆到载体上用通用引物测序，这是根据什么？我目前没准备好克隆，必须这么做么。。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-05 08:33:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhangyunjing

金虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-05 16:00:03
是将PCR产物进行测序吗？如果PCR产物测序的话需要对PCR产物切胶回收，采用ddH2O洗脱，洗脱之后跑胶看看有没有条带，如果有条带的话一般都能测序出来的
赞一下(1人) 回复此楼
rainwater
2楼2014-05-05 10:27:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-05 16:00:11
建议你按照公司的要求来做，就是把你的目的基因克隆到T载体上，送菌液进行测序
赞一下(1人) 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
3楼2014-05-05 12:07:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

王恺龙2010

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangyunjing at 2014-05-05 10:27:39
是将PCR产物进行测序吗？如果PCR产物测序的话需要对PCR产物切胶回收，采用ddH2O洗脱，洗脱之后跑胶看看有没有条带，如果有条带的话一般都能测序出来的

是这样做的，而且用我设计的引物得出的电泳条带还是很稳定的，所有组基本在一个位置，回收的条带十分之亮。结果告知没信号。。。
赞一下 回复此楼
4楼2014-05-05 16:44:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王恺龙2010

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-05-05 12:07:47
建议你按照公司的要求来做，就是把你的目的基因克隆到T载体上，送菌液进行测序

必须如此吗？这样做有什么根据呢？导师要求pcr产物直接测序。
赞一下 回复此楼
5楼2014-05-05 16:47:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 王恺龙2010 at 2014-05-05 16:47:42
必须如此吗？这样做有什么根据呢？导师要求pcr产物直接测序。...

我们实验室都是这么做的，或者送克隆后的质粒进行测序。如果你直接送PCR产物可能量很低，很难测，另外可能还需送你的引物，这样不是更麻烦吗？
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
6楼2014-05-05 17:08:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyunjing

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 王恺龙2010 at 2014-05-05 16:44:54
是这样做的，而且用我设计的引物得出的电泳条带还是很稳定的，所有组基本在一个位置，回收的条带十分之亮。结果告知没信号。。。...

送样测序的引物是PCR扩增时所用的引物吧，片段长度是多少？
赞一下 回复此楼
rainwater
7楼2014-05-06 08:32:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王恺龙2010

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhangyunjing at 2014-05-06 08:32:21
送样测序的引物是PCR扩增时所用的引物吧，片段长度是多少？...

片段长度约在250左右，是扩增用的引物
赞一下 回复此楼
8楼2014-05-06 09:34:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangjie2005

木虫 (小有名气)
换个测序公司试一下
赞一下 回复此楼
9楼2014-05-06 09:39:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyunjing

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 王恺龙2010 at 2014-05-06 09:34:28
片段长度约在250左右，是扩增用的引物...

那就没问题了，让公司重新测吧，肯定是公司那边测的问题
赞一下 回复此楼
rainwater
10楼2014-05-06 11:55:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 王恺龙2010 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +37 医学老男孩 2026-08-13 86/4300 2026-08-18 00:18 by longsantaizi
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +4 基诺咪客 2026-08-17 4/200 2026-08-17 16:10 by Vivilian
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +12 Ldrop2023 2026-08-13 15/750 2026-08-17 15:02 by 小豌豆_发芽
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +8 zju2000 2026-08-16 9/450 2026-08-17 12:20 by lmz0216
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 快农历七夕节了，轻松一下，男人悄悄话，女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[精细化工] 招聘 金属平磨液，抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭