应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » dna测序没信号
121/2返回列表12下一页
查看: 2684  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

王恺龙2010

铜虫 (初入文坛)

[求助] dna测序没信号

dna测序没信号，怎么解？
是提纯模板，重新设计引物，还是正反向都测一边（目前只在生工侧过两次正向的）？
至于公司给出的建议，克隆到载体上用通用引物测序，这是根据什么？我目前没准备好克隆，必须这么做么。。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-05-05 08:33:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhangyunjing

金虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-05 16:00:03
是将PCR产物进行测序吗？如果PCR产物测序的话需要对PCR产物切胶回收，采用ddH2O洗脱，洗脱之后跑胶看看有没有条带，如果有条带的话一般都能测序出来的
赞一下(1人) 回复此楼
rainwater
2楼2014-05-05 10:27:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-05-05 16:00:11
建议你按照公司的要求来做，就是把你的目的基因克隆到T载体上，送菌液进行测序
赞一下(1人) 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
3楼2014-05-05 12:07:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

王恺龙2010

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangyunjing at 2014-05-05 10:27:39
是将PCR产物进行测序吗？如果PCR产物测序的话需要对PCR产物切胶回收，采用ddH2O洗脱，洗脱之后跑胶看看有没有条带，如果有条带的话一般都能测序出来的

是这样做的，而且用我设计的引物得出的电泳条带还是很稳定的，所有组基本在一个位置，回收的条带十分之亮。结果告知没信号。。。
赞一下 回复此楼
4楼2014-05-05 16:44:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王恺龙2010

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-05-05 12:07:47
建议你按照公司的要求来做，就是把你的目的基因克隆到T载体上，送菌液进行测序

必须如此吗？这样做有什么根据呢？导师要求pcr产物直接测序。
赞一下 回复此楼
5楼2014-05-05 16:47:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 王恺龙2010 at 2014-05-05 16:47:42
必须如此吗？这样做有什么根据呢？导师要求pcr产物直接测序。...

我们实验室都是这么做的，或者送克隆后的质粒进行测序。如果你直接送PCR产物可能量很低，很难测，另外可能还需送你的引物，这样不是更麻烦吗？
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
6楼2014-05-05 17:08:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyunjing

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 王恺龙2010 at 2014-05-05 16:44:54
是这样做的，而且用我设计的引物得出的电泳条带还是很稳定的，所有组基本在一个位置，回收的条带十分之亮。结果告知没信号。。。...

送样测序的引物是PCR扩增时所用的引物吧，片段长度是多少？
赞一下 回复此楼
rainwater
7楼2014-05-06 08:32:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王恺龙2010

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by zhangyunjing at 2014-05-06 08:32:21
送样测序的引物是PCR扩增时所用的引物吧，片段长度是多少？...

片段长度约在250左右，是扩增用的引物
赞一下 回复此楼
8楼2014-05-06 09:34:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangjie2005

木虫 (小有名气)
换个测序公司试一下
赞一下 回复此楼
9楼2014-05-06 09:39:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangyunjing

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 王恺龙2010 at 2014-05-06 09:34:28
片段长度约在250左右，是扩增用的引物...

那就没问题了，让公司重新测吧，肯定是公司那边测的问题
赞一下 回复此楼
rainwater
10楼2014-05-06 11:55:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 王恺龙2010 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 2rKfVQg2jQww 2026-11-06 5/250 2026-11-07 17:34 by Xc2FxHsHkBNc
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 5/250 2026-11-07 17:01 by Xc2FxHsHkBNc
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +8 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 23/1150 2026-11-07 06:49 by Equinoxhua
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 7/350 2026-11-06 16:43 by 5sJFDKp2kwuI
[考博] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 8/400 2026-11-06 16:34 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 15/750 2026-11-06 13:49 by BkA9Bi5cMhkD
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +7 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-06 13:47 by BkA9Bi5cMhkD
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-05 5/250 2026-11-06 09:01 by 2lRNluKrJpwL
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:11 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 04:47 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 8/400 2026-11-06 02:24 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:42 by qL1cU46YIdK0
[基金申请] 各位基础老师们，看完中央《从严治党》的决定后，对学术界更加有信心了吧 +5 iaeyuan 2026-11-01 5/250 2026-11-04 14:43 by jinchengzi
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭