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jiangxincsu

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[求助] 蛋白诱导表达时候加IPTG的温度的问题已有2人参与

我本科是学化学的第一次做分子生物学
摇菌的时候师姐告诉我在OD=0.8左右的时候用冷水降温到20度时再加IPTG然后再放到20度的摇床上低温表达
为什么不直接加了IPTG再放到20度的摇床上让它自己冷却呢？这样有什么不同？
师姐告诉我后者的做法会让表达量降低

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1楼 2014-05-02 14:49:15

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for5

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

这不明显不同么。如果你是1，2ml液体量少无所谓，降温快，很快就达到设定温度。液体量大了，就需要一定时间才能达到预设温度。你这个是低温诱导，为的是可溶表达，温度高，蛋白合成快，形成包涵体，一般37度诱导，也就3h左右就ok了。所以听师姐的话

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操蛋的XX

2楼2014-05-02 15:52:12

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jiangxincsu

金虫 (小有名气)

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2楼: Originally posted by for5 at 2014-05-02 15:52:12
这不明显不同么。如果你是1，2ml液体量少无所谓，降温快，很快就达到设定温度。液体量大了，就需要一定时间才能达到预设温度。你这个是低温诱导，为的是可溶表达，温度高，蛋白合成快，形成包涵体，一般37度诱导，也 ...

恩恩，我有听师姐的话的