| 查看: 2243 | 回复: 6 | ||
| 本帖产生 1 个 MicEPI ，点击这里进行查看 | ||
[求助]
IPTG诱导表达出现两条带，并离的很近，什么原因啊？
|
||
| BL21菌株 IPTG诱导后，经高压破碎，镍柱纯化后，出现两条带，并离的很近，什么原因啊？ |
回复此楼» 猜你喜欢
材料调剂
已经有4人回复
-
304求调剂
已经有14人回复
-
求调剂
已经有24人回复
-
一志愿华东理工085601材料工程303分求调剂
已经有7人回复
-
288环境专硕,求调材料方向
已经有25人回复
-
0703化学
已经有25人回复
-
求调剂 一志愿西南交通大学085701环境工程 282分
已经有12人回复
-
一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂
已经有3人回复
-
一志愿211，0703化学305分求调剂
已经有12人回复
-
一志愿211，化学学硕，310分，本科重点双非，求调剂
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 枯草芽孢杆菌聚谷氨酸降解酶基因的原核表达及酶性质分析
已经有5人回复
- 离子液体的取用问题
已经有9人回复
- T7载体的IPTG诱导
已经有10人回复
- IPTG诱导后，考染后什么蛋白条带都没有
已经有12人回复
- IPTG诱导
已经有15人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌工程菌不经过IPTG诱导能否大量表达
已经有3人回复
- 【求助/交流】十万火急，IPTG诱导是怎么回事，给我说个大概
已经有9人回复
- 【求助/交流】蛋白诱导表达不出目标条带
已经有41人回复
- 【求助/交流】IPTG诱导剂的用量
已经有5人回复
quiller2000
木虫 (著名写手)
- MicEPI: 3
- 应助: 160 (高中生)
- 贵宾: 0.114
- 金币: 2752.9
- 散金: 50
- 红花: 26
- 帖子: 1168
- 在线: 167.3小时
- 虫号: 895537
- 注册: 2009-11-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
scelab(金币+7, MicEPI+1): 高手，这些原因都是需要实践才能总结的出来的啊。 2011-12-31 00:56:01
感谢参与，应助指数 +1
scelab(金币+7, MicEPI+1): 高手，这些原因都是需要实践才能总结的出来的啊。 2011-12-31 00:56:01
|
首先，你要确定是诱导出来的带 在这个前提下，你可以先用你的目标蛋白的抗体检测一下，如果两条带都有信号，则有可能是降解（如果你的目标条带是滞后带）或者是蛋白质复合物（如果你的目标条带是前面的那个带） 如果是降解，那么有可能你的目标条带有特异性的降解，如果你做了几次都是这样的话。那么恭喜你，你应该马上去挖胶测序，看看是不是有特定的剪切位点，或者，保守一些，用其它的表达系统试试 如果是第二种，同样恭喜你，虽然是走SDS-PAGE，有的时候也是有这样的运气的，比如分子内的共价键结合；建议加大DTT的浓度试试 还有一种情况，你的蛋白引起了大肠杆菌或者说你的表达宿主中的某个蛋白质的超量表达，这也将是一个很有意思的问题。 祝你好运！ |
5楼2011-12-30 23:11:53
 |
2楼2011-12-18 19:11:22
dasheng1980
铁杆木虫 (知名作家)
大圣
- 应助: 64 (初中生)
- 金币: 7702.4
- 红花: 3
- 沙发: 7
- 帖子: 8882
- 在线: 412.8小时
- 虫号: 1363851
- 注册: 2011-08-09
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2011-12-30 13:15:43
4楼2011-12-30 14:58:24
liubowhict
金虫 (小有名气)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 939.4
- 散金: 1
- 红花: 1
- 帖子: 128
- 在线: 60.7小时
- 虫号: 1229220
- 注册: 2011-03-11
- 专业: 有机合成
6楼2012-02-27 09:53:28
 |
7楼2013-04-16 22:49:28
