应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 引物浓度不一致会导致PCR无扩增带么？
81/1返回列表
查看: 2234  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

带走云彩

银虫 (小有名气)

[求助] 引物浓度不一致会导致PCR无扩增带么？ 已有3人参与

如图，DL1000 Marker,1为F引物，2为R引物，3和4为分别用pfu和tac酶扩增结果，目的带约350bp，可是除了引物带什么也没有啊，求大神指导！！

引物浓度不一致会导致PCR无扩增带么？
20140427Ptrc改条件后PCR（1）.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
怎知一死生为虚诞？
1楼 2014-04-29 10:28:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

r-rainbow

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
模板加了多少？你确定PCR的条件没问题？
赞一下 回复此楼
2楼2014-04-29 11:06:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
带走云彩(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-29 18:18:21
带走云彩: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-05-06 19:55:48
PCR条件如何，一般引物浓度高 二聚体会多些，应该不会木有目的条带吧，搞个内参看下是不是模板的问题
赞一下 回复此楼
只有不断地失败才会成功
3楼2014-04-29 11:08:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

带走云彩

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by r-rainbow at 2014-04-29 11:06:32
模板加了多少？你确定PCR的条件没问题？

20ul体系，上来加了2ul模板，感觉多了，后来加了0.2ul，都没有扩增带，PCR条件也反复试了好些，降低了退火温度，增加了延伸时间和循环数，我也试过稀释引物，可都没有条带啊。。。
赞一下 回复此楼
怎知一死生为虚诞？
4楼2014-04-29 11:32:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

带走云彩

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zep616745243 at 2014-04-29 11:08:57
PCR条件如何，一般引物浓度高 二聚体会多些，应该不会木有目的条带吧，搞个内参看下是不是模板的问题

内参的意思是？我想试下该模版上的通用引物，可惜没有。。。
赞一下 回复此楼
怎知一死生为虚诞？
5楼2014-04-29 11:33:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zep616745243

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 带走云彩 at 2014-04-29 11:33:56
内参的意思是？我想试下该模版上的通用引物，可惜没有。。。...

内参就是模板上都有的指示物，如 β-actin 等，可以大致知道你的模板怎么样
赞一下 回复此楼
只有不断地失败才会成功
6楼2014-04-29 11:40:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
带走云彩: 金币+2, ★有帮助 2014-05-06 19:56:09
建议引物浓度尽量保持一致，可以先用楼上的建议试试模板，再不行可以试着重新设计引物
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
7楼2014-04-29 18:17:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fly_锋

铁虫 (初入文坛)
您好！看了你的说明，你说1，2是F，R引物？？平时我们的认知是说F.R分别代表前端引物和后端引物！PCR扩增，是需要同时加入前后端引物的。另外你的3.4的变量是酶？？有加入引物吗？？
赞一下 回复此楼
8楼2014-11-10 15:19:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 带走云彩 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 278求调剂 +25 范婷娜 2026-04-07 28/1400 2026-04-09 14:15 by Delta2012
[考研] 284求调剂 +4 让我上岸吧阿西 2026-04-09 4/200 2026-04-09 11:52 by 5268321
[考研] 一志愿0807 数一英一 313 有没有二轮调剂 +11 emokidd 2026-04-08 12/600 2026-04-09 09:24 by wyf236
[考研] 环境专硕调剂 +15 会说话的肘子 2026-04-06 15/750 2026-04-08 18:56 by 环化材-小生
[考研] 一志愿211电子信息347求调剂 +3 554916 2026-04-03 3/150 2026-04-07 23:22 by 如若时光倒流
[考研] 344求调剂 +11 魏子per 2026-04-07 11/550 2026-04-07 23:01 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂（085602，过四级，一志愿985） +25 化工人999 2026-04-04 26/1300 2026-04-07 22:06 by hemengdong
[考研] 生物学363调剂求助 +7 fanzhang6666 2026-04-06 9/450 2026-04-07 17:37 by lijunpoly
[考研] 081700学硕，323分，一志愿中国海洋大学求调剂学校 +19 披星河 2026-04-04 19/950 2026-04-07 15:00 by 上岸快快
[考研] 085404 293求调剂 +8 勇远库爱314 2026-04-06 9/450 2026-04-07 13:05 by flydream1314
[考研] （调剂）一志愿报考哈尔滨工业大学0857资源与环境专业378分考生 +7 狠狠加油 2026-04-05 8/400 2026-04-06 16:52 by momo皓
[考研] 求调剂 +11 xzghyuj 2026-04-04 11/550 2026-04-06 11:49 by lijunpoly
[考研] 315求调剂 +5 ＆123456789 2026-04-05 5/250 2026-04-05 19:55 by nepu_uu
[考研] 085600调剂 +9 东照照照 2026-04-04 9/450 2026-04-05 13:44 by ujn_zhuj
[考研] 290求调剂 +7 luoziheng 2026-04-04 7/350 2026-04-04 23:17 by lqwchd
[考研] 320求调剂 +3 一样圆 2026-04-04 3/150 2026-04-04 22:29 by 啵啵啵0119
[考研] 调剂 +11 JLLLLLLLLLL 2026-04-03 11/550 2026-04-04 22:21 by hemengdong
[考研] 348分环境工程·调剂 +10 吴彦祖24k 2026-04-03 11/550 2026-04-04 14:19 by 无际的草原
[考研] 334求调剂 +8 曾仰之 2026-04-03 8/400 2026-04-04 11:16 by w_xuqing
[考研] 求调剂机会 +5 意染ivy 2026-04-03 5/250 2026-04-03 15:13 by qoooooo614
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭