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melindag

木虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE如何检测我的蛋白亚基? 已有1人参与

以下是我的蛋白电泳图,marker之后,前两个条带是我的野生型菌株,后面六条条带是我的过表达菌株。本实验构建出来的过表达菌株,表达产物本身就是个蛋白亚基,sigma因子,分子量大小约为70000,野生型菌株自体也能表达。(图中结果并不能明确显示出我的构建结果)
请问, 对于这个蛋白我是否能用SDS-PAGE检测?如果可以,实验过程中,是否还要煮沸变性处理?若不能,请问有什么方法可以检测我这个蛋白亚基的表达情况?

SDS-PAGE如何检测我的蛋白亚基?
20140419过表达蛋白电泳.jpg
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melindag

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cauobama at 2014-04-22 13:01:46
实在看不出你过表达的蛋白在哪……

对的,该片段带有自己的天然启动子和一个强终止子,所以我没有诱导,直接过夜培养后破胞、跑胶。第一次SDS,上样也只上了5ul,所以条带更浅了。
3楼2014-04-22 14:03:08
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cauobama

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
实在看不出你过表达的蛋白在哪……

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-04-22 13:01:46
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