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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » SDS-PAGE如何检测我的蛋白亚基？
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melindag

木虫 (初入文坛)

[求助] SDS-PAGE如何检测我的蛋白亚基？已有1人参与

以下是我的蛋白电泳图，marker之后，前两个条带是我的野生型菌株，后面六条条带是我的过表达菌株。本实验构建出来的过表达菌株，表达产物本身就是个蛋白亚基，sigma因子，分子量大小约为70000，野生型菌株自体也能表达。（图中结果并不能明确显示出我的构建结果）
请问， 对于这个蛋白我是否能用SDS-PAGE检测？如果可以，实验过程中，是否还要煮沸变性处理？若不能，请问有什么方法可以检测我这个蛋白亚基的表达情况？

SDS-PAGE如何检测我的蛋白亚基？
20140419过表达蛋白电泳.jpg
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1楼2014-04-22 12:41:11
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cauobama

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
实在看不出你过表达的蛋白在哪……

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-04-22 13:01:46
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melindag

木虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cauobama at 2014-04-22 13:01:46
实在看不出你过表达的蛋白在哪……

对的，该片段带有自己的天然启动子和一个强终止子，所以我没有诱导，直接过夜培养后破胞、跑胶。第一次SDS，上样也只上了5ul，所以条带更浅了。
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3楼2014-04-22 14:03:08
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