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自在小雨

金虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 748.3
帖子: 26
在线: 4.3小时
虫号: 2245371
注册: 2013-01-16
性别: MM
专业: 微生物生理与生物化学

[求助] 毕赤酵母表达外源基因的问题已有2人参与

将外源目的基因导入ppic 9k 质粒后，电转入毕赤酵母，经PCR，核酸胶验证为阳性克隆后，进行摇瓶发酵，SDS-PAGE显示，有目的蛋白条带，且亮度较亮，但是一直没有酶活，求教各位大神，蛋白油正常分泌但是一直没有酶活的可能原因！！！

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实验虐我千百遍，我待实验如初恋

1楼2014-04-15 18:46:54

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nanaz1990

新虫 (初入文坛)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 40
帖子: 12
在线: 10.3小时
虫号: 3141281
注册: 2014-04-16
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

可能是蛋白活性中心发生糖基化，造成蛋白失活。

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3楼2014-04-16 16:35:40

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huangrui1988

铜虫 (小有名气)

应助: 73 (初中生)
金币: 1727.8
散金: 20
红花: 2
帖子: 201
在线: 210.1小时
虫号: 953497
注册: 2010-02-07
专业: 微生物资源与分类学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2014-04-16 09:49:54

糖基化啊，部分降解啊，形成融合蛋白什么之类的都可以造成失活。

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2楼2014-04-15 20:45:15

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