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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 毕赤酵母表达外源基因的问题
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自在小雨

金虫 (初入文坛)

[求助] 毕赤酵母表达外源基因的问题 已有2人参与

将外源目的基因导入ppic 9k 质粒后，电转入毕赤酵母，经PCR，核酸胶验证为阳性克隆后，进行摇瓶发酵，SDS-PAGE显示，有目的蛋白条带，且亮度较亮，但是一直没有酶活，求教各位大神，蛋白油正常分泌但是一直没有酶活的可能原因！！！
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实验虐我千百遍，我待实验如初恋
1楼 2014-04-15 18:46:54
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huangrui1988

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2014-04-16 09:49:54
糖基化啊，部分降解啊，形成融合蛋白什么之类的都可以造成失活。
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2楼2014-04-15 20:45:15
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nanaz1990

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可能是蛋白活性中心发生糖基化，造成蛋白失活。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-04-16 16:35:40
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