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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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绛珠_仙草

银虫 (小有名气)

[求助] 蛋白表达问题 已有5人参与

各位前辈,小妹正在表达一个蛋白约35KD,纯化做多抗,现无法确定其是否表达,还请指教!
SDS-PAGE同时跑32a空载 包涵体和上清,结果在35KD左右均有条带,空载和上清较淡,包涵体35KD处很浓,本以为表达了 结果用HIS标签纯化柱纯化跑胶完全没有条带,用HIS的一抗做WESTERN也没有任何条带!不知道原因,有否表达?接下来是否可以直接切胶打兔子呢,时间紧迫,犯愁!
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绛珠_仙草

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by c_jade at 2014-04-10 10:09:34
空载有条带,明显那个位置就不对呀,况且还纯化不出来,wb也没有。确定测序没问题了吗?会不会移框了

没问题呀真不知道怎么回事 但是包涵体目的条带位置有很浓的带呢空载的很淡
7楼2014-04-10 12:40:47
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-04-09 17:09:29
你还是搞搞清楚再去打兔子吧,搞清楚表达没表达,最多一周,大兔子要几周?万一没表达慌忙火急最终还是浪费时间。
2楼2014-04-09 14:57:18
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feilinshiji

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
妹子,空载都有条带就是不对啊,很明显没表达啊
3楼2014-04-09 23:39:54
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547star

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
拿包涵体变性复性处理过再考虑上柱纯化。
为什么
4楼2014-04-10 08:21:37
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