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有关重叠PCR的问题求指导，谢谢。。 已有2人参与
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我想将一段400bp DNA片段与一段3500bp DNA连接，请问重叠pcr适合吗？有什么要注意的？文献上说做重叠pcr的两条片段需大小接近，我这种情况是不是不适合使用重叠pcr？ 还望虫友指导下，谢谢啦！！！ |
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| 可以的，我曾经做过4K与200bp的overlap，设计引物的时候注意点，在设置overlap引物的时候，假设A与B overlap，将A的反向引物设置到60bp，30bp是A上面的，30bp是B上的，B的正向引物是A的反向引物的反向互补序列，也就是最终的overlap区能达到60bp，不知道这样描述你懂了没？ |
2楼2014-04-09 09:43:03
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Neo2000
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4楼2014-04-09 12:37:27
