应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 重叠PCR应该怎么做？
101/1返回列表
查看: 2705  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wlsky24

新虫 (正式写手)

[求助] 重叠PCR应该怎么做？

各位大侠，问下重叠PCR该怎么做？有没有具体的操作流程呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-19 16:12:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔
重叠？是做片段连接PCR吗？
赞一下 回复此楼
一直向前！
2楼2011-10-19 16:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zc10052157

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

wlsky24(金币+1): 具体PCR的时候该怎么做呢？先不加引物PCR几个循环，然后再加引物继续循环 2011-10-19 16:56:18
A B 两段基因  设计引物的时候让A的3端跟B的5端有部分重合，重合部分最好在15个碱基以上
赞一下 回复此楼
hold住
3楼2011-10-19 16:26:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlsky24

新虫 (正式写手)
具体PCR的时候该怎么做呢？
赞一下 回复此楼
4楼2011-10-19 16:55:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zc10052157

新虫 (正式写手)
★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good！ 2011-10-19 18:31:06
西瓜(金币+3): Good！ 2011-10-19 18:31:07
西瓜(金币-3): 重复评贴了，扣掉多给的金币。非常抱歉！ 2011-10-19 19:06:07
具体可以参照文献上的步骤   查找SOE PCR   

先把两段基因P成延伸的两段基因  再互为引物彼此延伸10个循环  再加入两端的引物  P出融合基因来
赞一下(3人) 回复此楼
hold住
5楼2011-10-19 17:27:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlsky24

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangxn2010 at 2011-10-19 16:19:18:
重叠？是做片段连接PCR吗？

恩，连接个抗性基因
赞一下 回复此楼
6楼2011-10-19 20:11:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlsky24

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zc10052157 at 2011-10-19 17:27:59:
具体可以参照文献上的步骤   查找SOE PCR   

先把两段基因P成延伸的两段基因  再互为引物彼此延伸10个循环  再加入两端的引物  P出融合基因来

我p了下，结果不太好
赞一下 回复此楼
7楼2011-10-19 20:12:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
上图看看呀。我们做重叠PCR都分两步，第一步是两个片段的融合，一般很多杂带，拖尾很严重，但是只要有一点微弱的目的片段就够了，因为我们还有第二步，就是用引物再把重叠好的片段进行特异扩增，这步就是普通的PCR了。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

wlsky24
8楼2011-10-19 20:55:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlsky24

新虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-10-19 20:55:31:
上图看看呀。我们做重叠PCR都分两步，第一步是两个片段的融合，一般很多杂带，拖尾很严重，但是只要有一点微弱的目的片段就够了，因为我们还有第二步，就是用引物再把重叠好的片段进行特异扩增，这步就是普通的PC ...

谢啦，我的P出来了
赞一下 回复此楼
9楼2011-10-19 23:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hackett

银虫 (小有名气)
3个片段的重叠pcr可以一步到位么？
赞一下 回复此楼
Dreamer
10楼2012-04-15 15:52:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wlsky24 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料284求调剂，一志愿郑州大学英一数二专硕 +9 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 9/450 2026-03-01 13:36 by 那个人样子好怪�
[考研] 290求调剂 +8 材料专硕调剂； 2026-02-28 9/450 2026-03-01 12:46 by 闭眼看蓝天
[考研] 0856化工专硕求调剂 +6 董boxing 2026-03-01 6/300 2026-03-01 12:45 by houyaoxu
[考研] 306分材料调剂 +3 chuanzhu川烛 2026-03-01 4/200 2026-03-01 12:32 by houyaoxu
[考研] 材料学调剂 +7 提神豆沙包 2026-02-28 9/450 2026-03-01 11:50 by 王伟要上岸啊
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考研] 291分工科求调剂 +7 science饿饿 2026-03-01 8/400 2026-03-01 10:43 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[论文投稿] Optics letters投稿被拒求助 30+3 luckyry 2026-02-26 4/200 2026-03-01 09:06 by babero
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 272求调剂 +4 田智友 2026-02-28 4/200 2026-03-01 06:43 by 刘兵
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +4 弗格个 2026-02-28 6/300 2026-02-28 22:00 by wang_dand
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭