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wlsky24

新虫 (正式写手)

[求助] 重叠PCR应该怎么做?

各位大侠,问下重叠PCR该怎么做?有没有具体的操作流程呢?
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

上图看看呀。我们做重叠PCR都分两步,第一步是两个片段的融合,一般很多杂带,拖尾很严重,但是只要有一点微弱的目的片段就够了,因为我们还有第二步,就是用引物再把重叠好的片段进行特异扩增,这步就是普通的PCR了。

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8楼2011-10-19 20:55:31
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zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔

重叠?是做片段连接PCR吗?
一直向前!
2楼2011-10-19 16:19:18
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zc10052157

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

wlsky24(金币+1): 具体PCR的时候该怎么做呢?先不加引物PCR几个循环,然后再加引物继续循环 2011-10-19 16:56:18
A B 两段基因  设计引物的时候让A的3端跟B的5端有部分重合,重合部分最好在15个碱基以上
hold住
3楼2011-10-19 16:26:01
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wlsky24

新虫 (正式写手)

具体PCR的时候该怎么做呢?
4楼2011-10-19 16:55:00
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