应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 重叠PCR应该怎么做？
101/1返回列表
查看: 2706  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wlsky24

新虫 (正式写手)

[求助] 重叠PCR应该怎么做？

各位大侠，问下重叠PCR该怎么做？有没有具体的操作流程呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-19 16:12:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhangxn2010

木虫 (著名写手)

让一切随风飞翔
重叠？是做片段连接PCR吗？
赞一下 回复此楼
一直向前！
2楼2011-10-19 16:19:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zc10052157

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

wlsky24(金币+1): 具体PCR的时候该怎么做呢？先不加引物PCR几个循环，然后再加引物继续循环 2011-10-19 16:56:18
A B 两段基因  设计引物的时候让A的3端跟B的5端有部分重合，重合部分最好在15个碱基以上
赞一下 回复此楼
hold住
3楼2011-10-19 16:26:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlsky24

新虫 (正式写手)
具体PCR的时候该怎么做呢？
赞一下 回复此楼
4楼2011-10-19 16:55:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zc10052157

新虫 (正式写手)
★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good！ 2011-10-19 18:31:06
西瓜(金币+3): Good！ 2011-10-19 18:31:07
西瓜(金币-3): 重复评贴了，扣掉多给的金币。非常抱歉！ 2011-10-19 19:06:07
具体可以参照文献上的步骤   查找SOE PCR   

先把两段基因P成延伸的两段基因  再互为引物彼此延伸10个循环  再加入两端的引物  P出融合基因来
赞一下(3人) 回复此楼
hold住
5楼2011-10-19 17:27:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlsky24

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhangxn2010 at 2011-10-19 16:19:18:
重叠？是做片段连接PCR吗？

恩，连接个抗性基因
赞一下 回复此楼
6楼2011-10-19 20:11:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlsky24

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by zc10052157 at 2011-10-19 17:27:59:
具体可以参照文献上的步骤   查找SOE PCR   

先把两段基因P成延伸的两段基因  再互为引物彼此延伸10个循环  再加入两端的引物  P出融合基因来

我p了下，结果不太好
赞一下 回复此楼
7楼2011-10-19 20:12:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
上图看看呀。我们做重叠PCR都分两步，第一步是两个片段的融合，一般很多杂带，拖尾很严重，但是只要有一点微弱的目的片段就够了，因为我们还有第二步，就是用引物再把重叠好的片段进行特异扩增，这步就是普通的PCR了。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

wlsky24
8楼2011-10-19 20:55:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wlsky24

新虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
8楼: Originally posted by 西瓜 at 2011-10-19 20:55:31:
上图看看呀。我们做重叠PCR都分两步，第一步是两个片段的融合，一般很多杂带，拖尾很严重，但是只要有一点微弱的目的片段就够了，因为我们还有第二步，就是用引物再把重叠好的片段进行特异扩增，这步就是普通的PC ...

谢啦，我的P出来了
赞一下 回复此楼
9楼2011-10-19 23:05:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hackett

银虫 (小有名气)
3个片段的重叠pcr可以一步到位么？
赞一下 回复此楼
Dreamer
10楼2012-04-15 15:52:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wlsky24 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 材料学硕318求调剂 +6 February_Feb 2026-03-01 8/400 2026-03-01 15:28 by YYYYX1234
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 281求调剂 +4 2026计算机_诚心 2026-03-01 4/200 2026-03-01 15:21 by chemisry
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 272求调剂 +5 材紫有化 2026-02-28 5/250 2026-03-01 11:51 by gaoxiaoniuma
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +3 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 6/300 2026-03-01 11:50 by gaoxiaoniuma
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 寻找调剂 +4 LYidhsjabdj 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:56 by sunny81
[考博] 博士自荐 +4 kkluvs 2026-02-28 4/200 2026-03-01 10:19 by 馥安馥安
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 272求调剂 +4 田智友 2026-02-28 4/200 2026-03-01 06:43 by 刘兵
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +4 弗格个 2026-02-28 6/300 2026-02-28 22:00 by wang_dand
[考研] 292求调剂 +3 yhk_819 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:57 by gaoxiaoniuma
[考研] 264求调剂 +3 巴拉巴拉根556 2026-02-28 3/150 2026-02-28 21:31 by gaoxiaoniuma
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭