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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 做蛋白质表达为什么没有条带？
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luna跃儿弯弯

新虫 (小有名气)

[求助] 做蛋白质表达为什么没有条带？ 已有6人参与

各位师兄师姐，我最近在做基因克隆，即大肠杆菌BL21中某一段基因序列在大肠杆菌中表达，把工程菌构建好之后做SDS-PAGE电泳后，为什么不见有条带表达呢？IPTG的浓度是1 mM/L，到底有哪些方面的原因呢？真心感谢！！
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1楼 2014-04-08 22:12:13
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d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 鼓励交流 2014-04-09 11:04:47
1. 你设计的时候目的基因的序列与tag之间有终止子或者移码么，这个要确认一下。
2. 诱导的时候条件对吗？包括诱导温度，诱导时候的OD值。
3. 尝试用其他宿主细胞试试。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2014-04-09 08:37:20
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luna跃儿弯弯

新虫 (小有名气)
补充：基因测序也是没有问题的
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2楼2014-04-08 22:13:05
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寻尘

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 鼓励交流 2014-04-09 11:04:52
目的基因插入载体后阅读框有没有发生改变？
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4楼2014-04-09 10:59:33
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luna跃儿弯弯

新虫 (小有名气)
啊？不知道，这个该怎么看是否发生改变了呢？求教

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2014-04-10 18:41:36
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