应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » SDS-PAGE两条带，Native-PAGE一条带能证明蛋白是纯的吗？
81/1返回列表
查看: 3122  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

小李爱学习

银虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE两条带，Native-PAGE一条带能证明蛋白是纯的吗？

我用DEAE-Sepharose和Superdex 200从芒果果实中分离纯化了一个具有分解蔗糖活性的蔗糖转化酶。类似的文献中说这个酶是糖蛋白。我做SDS电泳（考染）时显示的是分子量分别为45kDa和50kDa，不同浓度的两条带，做Native-PAGE时结果显示分子量大约为150kDa是一条带。这种结果有没有可能是这个蛋白是有分子量分别为45kDa和50kDa两种不同亚基组成的蛋白？这样可以证明得到的是一个蛋白吗？能证明蛋白是纯的吗？请各位高人指点
SDS-PAGE两条带，Native-PAGE一条带能证明蛋白是纯的吗？
Native-PAGE截图网页版.jpg


SDS-PAGE两条带，Native-PAGE一条带能证明蛋白是纯的吗？-1
SDS-PAGE截图网页.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-12-03 14:15:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小李爱学习: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-12-03 16:59:41
有可能是你说的情况，有文献报导说这个酶是多亚基复合体吗？
赞一下 回复此楼
2楼2013-12-03 15:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小李爱学习

银虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-03 15:56:10
有可能是你说的情况，有文献报导说这个酶是多亚基复合体吗？

不同来源的这种酶的文献报道大多都是同种亚基组成；有篇文献报道结果SDS是3条带，作者通过指纹图谱鉴定和免疫反应，得出SDS电泳过程中一条肽链分解成了2条不同分子量的肽链。
赞一下 回复此楼
3楼2013-12-03 16:59:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小李爱学习 at 2013-12-03 16:59:24
不同来源的这种酶的文献报道大多都是同种亚基组成；有篇文献报道结果SDS是3条带，作者通过指纹图谱鉴定和免疫反应，得出SDS电泳过程中一条肽链分解成了2条不同分子量的肽链。...

从你的Native-PAGE上看，大致可以说是一个复合体了，你的SDS-PAGE上有两条带，可能是两种不同亚基，也可能是一种亚基有不同的修饰。试试做一下质谱和免疫鉴定进一步确定一下。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-12-04 01:16:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小李爱学习

银虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-04 01:16:12
从你的Native-PAGE上看，大致可以说是一个复合体了，你的SDS-PAGE上有两条带，可能是两种不同亚基，也可能是一种亚基有不同的修饰。试试做一下质谱和免疫鉴定进一步确定一下。...

好的 谢谢 这一步正在进行。
赞一下 回复此楼
5楼2013-12-04 18:17:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

牛焕杰

银虫 (小有名气)
你好，我的情况也跟你差不多，也是在SDS-PAGE上跑出来两个条带，在Native-PAGE上就只有一个条带，能说明这个蛋白是有两个亚基吗？可以说蛋白已经达到电泳纯了吗？希望得到你的帮助
赞一下 回复此楼
6楼2014-10-20 21:00:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

牛焕杰

银虫 (小有名气)
还有你提到的“做Native-PAGE时结果显示分子量大约为150kDa是一条带”，你在Native-PAGE胶上怎么确定分子量的？
赞一下 回复此楼
7楼2014-10-20 21:01:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
7楼: Originally posted by 牛焕杰 at 2014-10-20 21:01:59
还有你提到的“做Native-PAGE时结果显示分子量大约为150kDa是一条带”，你在Native-PAGE胶上怎么确定分子量的？

Native-PAGE胶上不能确定分子量，因为迁移率受所带电荷影响，就是等电点影响。
赞一下 回复此楼
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
8楼2015-01-08 23:03:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小李爱学习 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 302求调剂 +12 呼呼呼。。。。 2026-03-17 12/600 2026-03-21 17:29 by ColorlessPI
[考研] 333求调剂 +4 87639 2026-03-21 4/200 2026-03-21 17:18 by 学员8dgXkO
[考研] 306求调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-18 4/200 2026-03-21 08:25 by laoshidan
[考研] 299求调剂 +6 △小透明* 2026-03-17 6/300 2026-03-21 02:42 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +3 Ma_xt 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:05 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南昌大学，327分，材料与化工085600 +9 Ncdx123456 2026-03-19 9/450 2026-03-20 23:41 by lovewei0727
[考研] 一志愿南京理工大学085701资源与环境302分求调剂 +4 葵梓卫队 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:02 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂，总分315（英一） +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 生物学调剂招人！！！ +3 山海天岚 2026-03-17 4/200 2026-03-19 21:34 by 怎么释怀
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +10 慕寒mio 2026-03-16 10/500 2026-03-19 15:26 by 丁丁*
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[硕博家园] 湖北工业大学 生命科学与健康学院-课题组招收2026级食品/生物方向硕士 +3 1喜春8 2026-03-17 5/250 2026-03-17 17:18 by ber川cool子
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭