24小时热门版块排行榜    

查看: 3288  |  回复: 7

小李爱学习

银虫 (正式写手)

[求助] SDS-PAGE两条带,Native-PAGE一条带能证明蛋白是纯的吗?

我用DEAE-Sepharose和Superdex 200从芒果果实中分离纯化了一个具有分解蔗糖活性的蔗糖转化酶。类似的文献中说这个酶是糖蛋白。我做SDS电泳(考染)时显示的是分子量分别为45kDa和50kDa,不同浓度的两条带,做Native-PAGE时结果显示分子量大约为150kDa是一条带。这种结果有没有可能是这个蛋白是有分子量分别为45kDa和50kDa两种不同亚基组成的蛋白?这样可以证明得到的是一个蛋白吗?能证明蛋白是纯的吗?请各位高人指点
SDS-PAGE两条带,Native-PAGE一条带能证明蛋白是纯的吗?
Native-PAGE截图网页版.jpg


SDS-PAGE两条带,Native-PAGE一条带能证明蛋白是纯的吗?-1
SDS-PAGE截图网页.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小李爱学习: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-12-03 16:59:41
有可能是你说的情况,有文献报导说这个酶是多亚基复合体吗?
2楼2013-12-03 15:56:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小李爱学习

银虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-03 15:56:10
有可能是你说的情况,有文献报导说这个酶是多亚基复合体吗?

不同来源的这种酶的文献报道大多都是同种亚基组成;有篇文献报道结果SDS是3条带,作者通过指纹图谱鉴定和免疫反应,得出SDS电泳过程中一条肽链分解成了2条不同分子量的肽链。
3楼2013-12-03 16:59:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小李爱学习 at 2013-12-03 16:59:24
不同来源的这种酶的文献报道大多都是同种亚基组成;有篇文献报道结果SDS是3条带,作者通过指纹图谱鉴定和免疫反应,得出SDS电泳过程中一条肽链分解成了2条不同分子量的肽链。...

从你的Native-PAGE上看,大致可以说是一个复合体了,你的SDS-PAGE上有两条带,可能是两种不同亚基,也可能是一种亚基有不同的修饰。试试做一下质谱和免疫鉴定进一步确定一下。
4楼2013-12-04 01:16:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小李爱学习

银虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-04 01:16:12
从你的Native-PAGE上看,大致可以说是一个复合体了,你的SDS-PAGE上有两条带,可能是两种不同亚基,也可能是一种亚基有不同的修饰。试试做一下质谱和免疫鉴定进一步确定一下。...

好的 谢谢 这一步正在进行。
5楼2013-12-04 18:17:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

牛焕杰

银虫 (小有名气)

你好,我的情况也跟你差不多,也是在SDS-PAGE上跑出来两个条带,在Native-PAGE上就只有一个条带,能说明这个蛋白是有两个亚基吗?可以说蛋白已经达到电泳纯了吗?希望得到你的帮助
6楼2014-10-20 21:00:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

牛焕杰

银虫 (小有名气)

还有你提到的“做Native-PAGE时结果显示分子量大约为150kDa是一条带”,你在Native-PAGE胶上怎么确定分子量的?
7楼2014-10-20 21:01:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

引用回帖:
7楼: Originally posted by 牛焕杰 at 2014-10-20 21:01:59
还有你提到的“做Native-PAGE时结果显示分子量大约为150kDa是一条带”,你在Native-PAGE胶上怎么确定分子量的?

Native-PAGE胶上不能确定分子量,因为迁移率受所带电荷影响,就是等电点影响。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
8楼2015-01-08 23:03:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 小李爱学习 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +4 炎黄贵胄 2026-08-22 5/250 2026-08-24 02:09 by 流流伤
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +16 羊腰板 2026-08-21 17/850 2026-08-23 23:02 by tianxiaochun
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 什么时候开奖? +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见