| 查看: 1821 | 回复: 2 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
lavender2056新虫 (初入文坛)
|
[求助]
关于构建载体时加装内含子编码基因 已有1人参与
|
|||
| 用哺乳动物细胞中的载体来表达外源的真核生物的基因时，通常需要在载体上加装编码内含子的序列，但是真核生物的基因序列上通常都含有自己的内含子，为什么载体上还要再装？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 分子生物学技术 |
» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有74人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 如何插入内含子到目的基因？
已经有5人回复
- 利用PET-28b构建重组载体时将目的基因插在lac I基因中的酶切位点可以么
已经有4人回复
- 如何进行基因中外显子和内含子的分析
已经有11人回复
- 蛋白表达不出来，是什么原因造成的
已经有7人回复
- 大牛来指点下啊~CDS区到底含不含内含子？看了相关的帖反而把我搞糊涂了
已经有44人回复
- 基因缺失的载体构建
已经有4人回复
- 目的基因构建载体方向问题概念有点不清楚，请教各位大侠
已经有5人回复
- 基因序列比对 内含子比对
已经有8人回复
- 目的基因表达载体的构建问题~请指教
已经有6人回复
- 小片段基因文库构建中载体的选择
已经有15人回复
- 已知一个真菌全基因组如何分析它的内含子和外显子
已经有3人回复
- 对于一个没有内含子的基因，请问用基因组或cDNA作为模板跑PCR对于结果有什么影响吗？
已经有11人回复
- 构建了个基因的表达载体，发现有一个氨基酸发生突变
已经有10人回复
- 真菌的基因克隆与表达 为什么要去除内含子？
已经有5人回复
- pMD18-T载体与目的基因连接后构建的质粒能通过接合转移到一些难以转化的细菌中吗？
已经有8人回复
- 构建pBI121表达载体，目的基因与载体连接不上
已经有54人回复
- 载体构建技术请教，如何设计引物提取基因插入载体中？
已经有3人回复
- 已知全长基因怎样克隆并构建表达载体
已经有8人回复
- 【求助/交流】基因没有内含子序列说明什么问题啊
已经有5人回复
- 【求助/交流】是否所有的基因都有内含子？
已经有11人回复
- 【求助/交流】从RNA中扩出含内含子的全基因片段
已经有12人回复
- 【求助/交流】跨越内含子序列的基因组序列的翻译如何进行
已经有3人回复
- 【求助/交流】在构建基因表达载体的时候什么时候需要人为地在上面加上启动子？
已经有6人回复
3楼2020-07-01 16:20:37
biostar2009
专家顾问 (正式写手)
-
专家经验: +220 - MolEPI: 20
- 应助: 231 (大学生)
- 金币: 10415.9
- 散金: 387
- 红花: 63
- 帖子: 540
- 在线: 151.9小时
- 虫号: 2811882
- 注册: 2013-11-19
- 专业: 生物化学
- 管辖: 分子生物
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-04-03 21:27:03
gyesang: MolEPI+1, 专业！ 2014-04-04 00:20:48
lavender2056: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-04-05 13:53:32
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-04-03 21:27:03
gyesang: MolEPI+1, 专业！ 2014-04-04 00:20:48
lavender2056: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-04-05 13:53:32
|
你注意到了一个有趣的现象，但是又忽视了一个简单的概念！ 一般而言，用载体表达一个基因，就是把这个基因的CDS区，或者你感兴趣的某一段CDS区，装到一个真核表达载体。所谓真核表达载体，就是有真核表达元件的一个质粒，一般有个启动子，还有个polyA信号。这样就可以实现这个基因的外源表达了。 正如你注意到的，真核生物基因一般都有很多内含子。这些内含子是真核生物mRNA表达的一个重要部分，虽然它们并不参与最终蛋白的编码，但是几乎参与pre-mRNA核内加工的很多步骤，而且这些步骤都是以耦连的方式发生的。 比如内含子的去除就与mRNA的出核相关，因为剪接的过程中很多结合到这段mRNA的很多蛋白是出核必须的。也就是说，如果一段RNA没有内含子，没有剪接这个过程，就很不容易出核。 这一点，正是外源表达的CDS的一个问题。这些强启动子驱动了大量的mRNA表达，但是出核的比例却相比内源基因低非常多，等于说是降低了最终表达蛋白的能力。 所以，很多“考究”的真核表达载体，会有一段称为IVE的序列，这个是intron的早期另一个叫法，这个序列来自非常清楚的基因的内含子，也就是说，从哪到哪会被剪接，非常清楚，不会担心伤害到有用的序列。 通过这么一个IVE，让这些RNA经历一下剪接，可以极大的促进他们的出核，也就可以增大最终蛋白合成的水平。 你可以找些材料继续学习。 |
2楼2014-04-03 19:21:55
100