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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 大家来看一下我做的酶切电泳图，看不明白
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yushijiang30

新虫 (初入文坛)

[求助] 大家来看一下我做的酶切电泳图，看不明白 已有1人参与

我的电泳图，2泳道是没有酶切的质粒对照，3，4泳道为我的双酶切，有两条带，请问哪个才是我切出来的目的片段？载体酶切位点是画圈的XhoI，NcoI，两者相距80多bp，是不是有一条带是没酶切完全的？ Marker是1万的marker
我的酶切体系（50微升，takara酶）：快切酶buffer：5微升，XhoI 2微升，NcoI 2微升，载体20微升，ddH2O 21 微升，载体浓度为370纳克/微升。




大家来看一下我做的酶切电泳图，看不明白
双酶切图.jpg
大家来看一下我做的酶切电泳图，看不明白-1
360软件小助手截图20140327094652_副本.jpg
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1楼 2014-03-27 11:04:48
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yushijiang30

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by njuzhangxin at 2014-03-27 12:12:38
酶切了多长时间？按照道理，如果酶切完全，应该只有一条带。

我用的takara的快速内切酶，37度反应了大概2个小时
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5楼2014-03-27 12:17:22
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lpzl

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
下面一条是目的片段吧。。。
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Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
2楼2014-03-27 11:10:05
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yushijiang30

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lpzl at 2014-03-27 11:10:05
下面一条是目的片段吧。。。

如果是下边的，线性的不是比没酶切完的跑的慢吗，酶切开的是不是应该比对照更靠上啊？
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3楼2014-03-27 11:16:56
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njuzhangxin

铁杆木虫 (小有名气)
酶切了多长时间？按照道理，如果酶切完全，应该只有一条带。
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4楼2014-03-27 12:12:38
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