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windleakey

金虫 (小有名气)

[求助] PCR产物连T载体转化后,阳性率低 已有3人参与

RT,最近实验发现,PCR产物经纯化后连T载体,转化后阳性率总是很低,挑10个单克隆做PCR可能只有一个是阳性的,虽然能得到想要的,但还是觉得很奇怪,不知道是什么原因。
请问有大神知道吗?
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wangguosing

金虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 应助指数-1, 没有帮助楼主解答问题,不能获得应助指数 2014-03-23 10:03:37
我也是,咋办,我的是氨氧化古菌的,怎么办
3楼2014-03-23 09:22:24
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Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)

蓝白斑筛选了没?
2楼2014-03-22 23:27:47
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 19:57:53
转化效率很低,可以换种转化效率高的感受态细胞试试;也有肯能连接效率太低,建议变化一下体系的量,延长连接时间
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
4楼2014-03-23 10:05:02
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windleakey

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Lau_Kimura at 2014-03-22 23:27:47
蓝白斑筛选了没?

没有筛啊,我们一般直接PCR筛,这次筛10个只有一个p出来
5楼2014-03-23 14:29:31
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