应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 菌液PCR为什么有杂带而且挺亮的
61/1返回列表
查看: 2562  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jyfxmc

新虫 (小有名气)

[求助] 菌液PCR为什么有杂带而且挺亮的 已有2人参与

到底是怎么回事呢，我的目的条带1100左右 。marker分别为250 500 1000 1500 2000 2500，中间最亮的是我做的阳性对照，最后面的孔是阴性对照，连接的PMD18T ，PCR反应条件为94度 5min ，94度30秒  ，55度30秒，55度 1 min， 72度 7min。

菌液PCR为什么有杂带而且挺亮的
4B8AECFB03AC266B9249AA930EEC268D.jpg


菌液PCR为什么有杂带而且挺亮的-1
4B8AECFB03AC266B9249AA930EEC268D.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-03-21 10:14:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jyfxmc(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:42:48
都是非特异性条带，建议重新连接转化，或者从头开始，扩增时可以适当提高退火温度
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
2楼2014-03-21 10:26:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hg30717580

木虫 (职业作家)

总经理

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
jyfxmc(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:42:56
建议提高退火温度，减少延长时间。试试看
赞一下 回复此楼
突破自我，喜迎曙光
3楼2014-03-21 16:46:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jyfxmc

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-03-21 10:26:23
都是非特异性条带，建议重新连接转化，或者从头开始，扩增时可以适当提高退火温度

这种情况是没连上的可能性大，还是没有PCR出来的可能性大呢
赞一下 回复此楼
4楼2014-03-21 18:02:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jyfxmc

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-03-21 10:26:23
都是非特异性条带，建议重新连接转化，或者从头开始，扩增时可以适当提高退火温度

我后来提质粒，做了单酶切，发现条带比空载体序列要大，拿去测序，回来又发现是空载体和些其他序列，也不是我的目的片段，是怎么回事呢？
赞一下 回复此楼
5楼2014-03-21 18:05:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
★
jyfxmc(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:43:07
引用回帖:
5楼: Originally posted by jyfxmc at 2014-03-21 18:05:51
我后来提质粒，做了单酶切，发现条带比空载体序列要大，拿去测序，回来又发现是空载体和些其他序列，也不是我的目的片段，是怎么回事呢？...

你在双酶切前有进行PCR验证吗？没的话建议先验证一下，不过以你测序结果来看，建议重新来过
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
6楼2014-03-21 20:57:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jyfxmc 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭