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你所浪费的今天是昨天死去的人所奢望的明天，你所厌恶的现在是你回不去的曾经，活在当下

1楼2014-03-20 21:10:45

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咆哮的白菜

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菜菜0929: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-03-21 11:10:57

非特异性扩增，模板浓度比较高，扩增效率不好，问题挺多，数据基本不可用。

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姥姥不疼，舅舅不爱

6楼2014-03-21 09:11:16

jiaolong11a

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7楼: Originally posted by 菜菜0929 at 2014-03-21 11:06:47
我是想做一个内参基因，一个靶基因，然后按照2-ΔΔCt法作图，不知道这样是否可以消除cDNA模板浓度不一致的影响?...

是可以消除，但有非特异性扩增，这个数据就不准了，建议做个标准曲线，看看是不是成线性，如果不是，就要换引物来了

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多情总被无情扰。。。愁

10楼2014-03-21 11:26:05

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steamsn

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菜菜0929: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-03-21 11:10:34

cDNA浓度就是模板浓度，看Ct值，熔解曲线看引物非特异性扩增，是否单一峰

我命由我不由天

2楼2014-03-20 21:22:58

牛奶可乐

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菜菜0929(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:51:10

第二张扩增曲线图，比较每一条曲线与基线所对应的横坐标的CT值，CT值越大的代表模板浓度越大。不知道清除了不

付出就会有收获

3楼2014-03-21 08:25:59

牛奶可乐

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菜菜0929: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-21 11:00:19

第二张扩增曲线图，比较每一条曲线与基线所对应的横坐标的CT值，CT值越大的代表模板浓度越小。不知道清除了不

不好意思。。。刚才写错了

付出就会有收获

4楼2014-03-21 08:27:08

jiaolong11a

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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 19:51:30

你的溶解曲线看出有非特异性扩增，不怎么好。看扩增曲线的话，浓度是有差距的，最大值和最小值之间估计得有10倍

多情总被无情扰。。。愁

5楼2014-03-21 08:48:42

菜菜0929

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5楼: Originally posted by jiaolong11a at 2014-03-21 08:48:42
你的溶解曲线看出有非特异性扩增，不怎么好。看扩增曲线的话，浓度是有差距的，最大值和最小值之间估计得有10倍

我是想做一个内参基因，一个靶基因，然后按照2-ΔΔCt法作图[ΔΔCt＝（Ct靶基因－Ct内参）处理组－（Ct靶基因－Ct内参）对照组]，不知道这样是否可以消除cDNA模板浓度不一致的影响?

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4楼: Originally posted by 牛奶可乐 at 2014-03-21 08:27:08
第二张扩增曲线图，比较每一条曲线与基线所对应的横坐标的CT值，CT值越大的代表模板浓度越小。不知道清除了不

不好意思。。。刚才写错了

你所浪费的今天是昨天死去的人所奢望的明天，你所厌恶的现在是你回不去的曾经，活在当下

8楼2014-03-21 11:09:56

菜菜0929

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6楼: Originally posted by 咆哮的白菜 at 2014-03-21 09:11:16
非特异性扩增，模板浓度比较高，扩增效率不好，问题挺多，数据基本不可用。

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