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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请教荧光定量PCR结果图？我的这张能看出来什么问题？
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菜菜0929

木虫 (小有名气)
引用回帖:
20楼: Originally posted by min8717 at 2014-03-24 16:18:45
这就是相对定量法嘛，是要这样做的啊...

哦，那CDNA可以一个星期之内放到4度吗？我不想反复冻融它
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你所浪费的今天是昨天死去的人所奢望的明天，你所厌恶的现在是你回不去的曾经，活在当下
21楼2014-03-24 17:38:12
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jiaolong11a

新虫 (小有名气)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 菜菜0929 at 2014-03-24 16:07:30
我还想问一下怎么避免稀释完的cDNA反复冻融？我想把它放到-4℃可以吗？我打算1周内做完...

可以分装下，放在-20度，用的时候拿一管出来。另外dna还是蛮坚强的，4度一星期应该可以
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多情总被无情扰。。。愁
22楼2014-03-25 08:53:15
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-25 10:46:24
我算的是这个：
相对定量结果=2乘方（ΔΔCt）
ΔΔCt=[Ct（对照组，目的基因） + Ct（实验组，内参基因） - Ct（实验组，目的基因） - Ct（对照组，内参基因）]
和你的正负号不同
各个样品的模板浓度可以不同，但是同批次实验各样品的上样体积保持一直。
你的内参基因的模板偏高，检测的正确性会低些。
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23楼2014-03-25 10:41:47
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cituyuqi

新虫 (初入文坛)
引物不特异而且样本量太高，你是多少的RNA量做的反转录？再就是QPCR扩增时的上样量是多少？
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赫赫
24楼2014-04-24 09:09:04
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龙影星痕1990

新虫 (初入文坛)
溶解曲线的峰不重合，说明扩增出来的条带是不一致的
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25楼2015-05-07 21:43:08
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