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菜菜0929

木虫 (小有名气)

引用回帖:
20楼: Originally posted by min8717 at 2014-03-24 16:18:45
这就是相对定量法嘛,是要这样做的啊...

哦,那CDNA可以一个星期之内放到4度吗?我不想反复冻融它
你所浪费的今天是昨天死去的人所奢望的明天,你所厌恶的现在是你回不去的曾经,活在当下
21楼2014-03-24 17:38:12
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jiaolong11a

新虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by 菜菜0929 at 2014-03-24 16:07:30
我还想问一下怎么避免稀释完的cDNA反复冻融?我想把它放到-4℃可以吗?我打算1周内做完...

可以分装下,放在-20度,用的时候拿一管出来。另外dna还是蛮坚强的,4度一星期应该可以
多情总被无情扰。。。愁
22楼2014-03-25 08:53:15
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-25 10:46:24
我算的是这个:
相对定量结果=2乘方(ΔΔCt)
ΔΔCt=[Ct(对照组,目的基因) + Ct(实验组,内参基因) - Ct(实验组,目的基因) - Ct(对照组,内参基因)]
和你的正负号不同
各个样品的模板浓度可以不同,但是同批次实验各样品的上样体积保持一直。
你的内参基因的模板偏高,检测的正确性会低些。
23楼2014-03-25 10:41:47
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cituyuqi

新虫 (初入文坛)

引物不特异而且样本量太高,你是多少的RNA量做的反转录?再就是QPCR扩增时的上样量是多少?
赫赫
24楼2014-04-24 09:09:04
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龙影星痕1990

新虫 (初入文坛)

溶解曲线的峰不重合,说明扩增出来的条带是不一致的
25楼2015-05-07 21:43:08
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