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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » EcoR1酶切体系
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木vs木

金虫 (小有名气)

[求助] EcoR1酶切体系

那位有EcoR1酶切体系，这几天做酶切，但总是切不出目的片段，质粒可以扩增出目的片段，测了质粒浓度，约2000纳克每微升

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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坚持就是胜利！
1楼 2014-01-12 15:28:21
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木vs木

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-01-12 20:26:34
EcoRI有星号活性，建议酶切时质粒浓度不要太高。

大约浓度多大合适？

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坚持就是胜利！
6楼2014-01-13 03:44:58
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gyesang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-12 18:50:07
EcoRI这个酶很好用，跟体系关系不大
1.  确保你序列里面有EcoRI的识别位点
2.  确保你的EcoRI酶没有失活
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-01-12 16:19:52
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木vs木

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2014-01-12 16:19:52
EcoRI这个酶很好用，跟体系关系不大
1.  确保你序列里面有EcoRI的识别位点
2.  确保你的EcoRI酶没有失活

这个酶切位点是19-t自带的，酶也没问题

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坚持就是胜利！
3楼2014-01-12 18:02:19
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gyesang

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 木vs木 at 2014-01-12 18:02:19
这个酶切位点是19-t自带的，酶也没问题
...

那就是没有连上片段呗
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2014-01-12 19:24:22
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