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木vs木

金虫 (小有名气)

[求助] EcoR1酶切体系

那位有EcoR1酶切体系,这几天做酶切,但总是切不出目的片段,质粒可以扩增出目的片段,测了质粒浓度,约2000纳克每微升

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gyesang

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引用回帖:
3楼: Originally posted by 木vs木 at 2014-01-12 18:02:19
这个酶切位点是19-t自带的,酶也没问题
...

那就是没有连上片段呗
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2014-01-12 19:24:22
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-12 18:50:07
EcoRI这个酶很好用,跟体系关系不大
1.  确保你序列里面有EcoRI的识别位点
2.  确保你的EcoRI酶没有失活
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2014-01-12 16:19:52
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木vs木

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2014-01-12 16:19:52
EcoRI这个酶很好用,跟体系关系不大
1.  确保你序列里面有EcoRI的识别位点
2.  确保你的EcoRI酶没有失活

这个酶切位点是19-t自带的,酶也没问题

[ 发自小木虫客户端 ]
坚持就是胜利!
3楼2014-01-12 18:02:19
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
EcoRI有星号活性,建议酶切时质粒浓度不要太高。

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hehe
5楼2014-01-12 20:26:34
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