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如何将质粒转入酿酒酵母啊
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siyecaodewo
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如何将质粒转入酿酒酵母啊
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目前用的是电转,5ul质粒转,电转后用山梨醇,可是转不成功,求助求助
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【求助/交流】为什么质粒转化后晒出的菌在原培养基上长不出
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2013-12-17 15:11:43
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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。
2013-12-18 17:32:20
siyecaodewo: 金币+2,
★
有帮助, 电转似乎还是不行,选择酿酒酵母一档,电转经常会吱的一声,查看电转时间几乎为0,选择1.5kv时,时间还多一点,但是把筛选平板上的菌提质粒却没有。今年打算用化转试试。谢谢你哦
2014-02-20 11:51:43
电转化,电转后直接用YPD培养。
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2楼
2013-12-17 16:17:25
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lpzl
at 2013-12-17 16:17:25
电转化,电转后直接用YPD培养。
长了一点点,很小,现在都没怎么长大了,怕只是在ypd上长了的,不能再选择培养基上长,过几天pcr下跑个胶试试,觉得希望不大啊。不知道化学法会不会好些
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2013-12-26 13:29:02
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siyecaodewo
at 2013-12-26 13:29:02
长了一点点,很小,现在都没怎么长大了,怕只是在ypd上长了的,不能再选择培养基上长,过几天pcr下跑个胶试试,觉得希望不大啊。不知道化学法会不会好些...
电转后,立即向电极杯中加入1ml YPD于30度复苏1小时,然后再涂平板。。。
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2013-12-26 18:30:14
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2013-12-27 09:40:58
其实觉得醋酸锂转化也不错,就是繁琐了点,效果还是可以的。
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我不会!
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2013-12-26 20:05:47
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at 2013-12-26 18:30:14
电转后,立即向电极杯中加入1ml YPD于30度复苏1小时,然后再涂平板。。。...
我一般用1mlYPDS,应该没问题吧,顺便求教一下,电转化后加1M山梨醇的作用是复苏吗?为什么要用1M山梨醇复苏。。
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2013-12-26 22:11:49
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luwei13566
at 2013-12-26 22:11:49
我一般用1mlYPDS,应该没问题吧,顺便求教一下,电转化后加1M山梨醇的作用是复苏吗?为什么要用1M山梨醇复苏。。...
加山梨醇的作用:增加细胞膜的通透性。在毕赤酵母表达系统中,加入山梨醇还具有碳源的作用
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2013-12-27 08:44:05
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at 2013-12-27 08:44:05
加山梨醇的作用:增加细胞膜的通透性。在毕赤酵母表达系统中,加入山梨醇还具有碳源的作用...
论复苏效果山梨醇应该没有YPD好吧。~
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2013-12-27 09:40:15
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论复苏效果山梨醇应该没有YPD好吧。~...
我个人觉得用YPD,我也一直用YPD,不过你可以都试试。。。
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9楼
2013-12-27 10:23:16
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at 2013-12-27 10:23:16
我个人觉得用YPD,我也一直用YPD,不过你可以都试试。。。...
我一直用YPDS,YPD和山梨醇都摆在酵母面前,酵母想吃哪个吃哪个,吃腻了可以换换口味。。。
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2013-12-27 11:15:10
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