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aofeng860308

木虫 (正式写手)


[交流] strep tag纯化,洗脱不下来

请教各位:
近期在做strep tag的标签蛋白纯化,GE的柱子,按产品说明书的方法进行操作,但是用2.5mM脱硫生物素(pH7.3和pH8.0)都么有蛋白被洗脱,用0.5M的NaOH进行再生时有蛋白峰被洗脱出,经SDS-PAGE检测基本确定为目的蛋白。
为什么在洗脱时么有蛋白被洗脱出,有么有改进的方法呢?
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花雨渡飞仙

金虫 (正式写手)


★ ★
aofeng860308(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流! 2014-01-27 19:57:36
梯度和洗脱时间修改一下再看看呐。
另外不会是系统有问题了吧,比如流速不准、阀切换问题等
18楼2013-12-18 13:56:32
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zilinweizhu

银虫 (小有名气)


★ ★ ★
aofeng860308(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-15 21:57:43
我以前用的时候是把脱硫生物素溶在buffer里面,buffer是Tris+NaCl,pH8.0。
14楼2013-12-14 12:46:35
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2013-12-14 11:20   回复  
aofeng860308(金币+1): 谢谢参与
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