24小时热门版块排行榜

返回列表

liuchao_40

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1
帖子: 18
在线: 8.8小时
虫号: 1269591
注册: 2011-04-18
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 去污剂在蛋白纯化中的作用

我现在做的蛋白，无论构建什么标签的，亲和层析后，无论怎样都洗脱不下来，跑胶结果显示蛋白全在介质上。师兄说，下次破菌的时候在BUFFER里加上1%的去污剂，Triton，吐温，NP40都加上。但是我不明白，加上这些有什么作用。有哪位高人，能指点一二？感激不尽啊！

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

报告基因已经有6人回复

1楼 2011-09-21 23:52:25

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

lhczj

金虫 (小有名气)

BioEPI: 2
应助: 1 (幼儿园)
金币: 998.6
帖子: 116
在线: 83.3小时
虫号: 597472
注册: 2008-09-09
性别: GG
专业: 生物技术药物

【答案】应助回帖

★
看天(金币+1): 鼓励 2011-09-23 22:21:56

最好把你的信息写全些，如什么蛋白，加的什么标签，采用的层析条件是什么，也许不用加去污剂的。

赞一下(1人)

回复此楼

2楼2011-09-22 08:32:42

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

liuchao_40

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1
帖子: 18
在线: 8.8小时
虫号: 1269591
注册: 2011-04-18
专业: 生物大分子结构与功能

呵呵！我做的是病毒的核衣壳蛋白，就是NP了。pGEX-6P-1,pET-28a载体都构建了，也都纯过。过完GST柱，Ni柱后效果都是一样得，目的蛋白怎么样都是洗脱不下了。取介质跑胶，发现蛋白全在介质上。所以才想加去垢剂。今天加了去垢剂做了，效果还是一样不好。不知道还有没有方法纯这个蛋白？硫酸铵沉淀法有用么？

赞一下

回复此楼

3楼2011-09-23 00:33:30

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖