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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 片段连接转化涂布问题
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转基因猴子

木虫 (正式写手)

[求助] 片段连接转化涂布问题 已有2人参与

各位虫子
最近几次我做连接转化，都出现问题，请各位帮我看看，提提建议，比较着急
我的目的片段经过PCR，切胶回收验证后，单条带大小也差不多。之后我连接T载转化JM109感受态细胞。最近几次一直出现下面问题。如下图：
整个平板边上一圈菌膜，周边有几个非常小的菌落。中间没有什么菌落。结果那些菌落都不对的。各位，为什么会出现这种情况？之前我做克隆的时候没有出现这个情况，最近几次都出现这个问题，有人能告诉我是哪里出问题了？
谢谢各位虫子
片段连接转化涂布问题
IMG_20131211_092551[1].jpg


片段连接转化涂布问题-1
IMG_20131211_092601[1].jpg
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我还年轻，我要上路！
1楼 2013-12-11 09:46:51
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lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-11 15:17:22
转基因猴子: 金币+4, ★★★很有帮助, 谢谢，我试试 2013-12-11 17:55:36
可能是抗生素失效了，也可能是JM109细胞被污染了。
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2楼2013-12-11 10:04:35
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-11 15:17:35
转基因猴子: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-12-11 17:55:47
楼上正解。转化时做对照了吗？将空感受态涂抗性板是否也长成这样？
赞一下 回复此楼
3楼2013-12-11 13:38:52
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zz53qq53

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
转基因猴子: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢 2013-12-11 17:55:55
感受态出问题了把，做个阳性、阴性对照看看啊
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4楼2013-12-11 16:17:45
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