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1楼2013-12-06 15:27:44

荞麦tao

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引用回帖:

2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-07 04:55:11
不要把胶放干了才拿来照相。你要分析什么？样品是什么？是否有对照？期望看到什么？

左边可以看到的两个泳道是沉淀跑出的条带，第三个泳道是marker左边是上清液跑出的条带，我的目的蛋白是绿色荧光蛋白，大约在31.9kDa处。沉淀中可以清楚的看出目的蛋白的条带，但是上清液中却几乎看不到，能说明目的蛋白大多集中在沉淀中吗？还是说沉淀中哪只是包涵体？

3楼2013-12-08 20:55:08

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cicelyzh

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137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-12-07 09:19:09

不要把胶放干了才拿来照相。你要分析什么？样品是什么？是否有对照？期望看到什么？

2楼2013-12-07 04:55:11

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
荞麦tao: 金币+3, ★★★★★最佳答案 2013-12-11 14:49:51

沉淀里包括包涵体和未破碎的菌体，在上样buffer的作用下，细菌会被裂解。如果完全是包涵体，杂带会很少。我看你的上清里面蛋白不多而沉淀里带比较多，说明破碎效果不好。需要调整一下破碎条件。你是做的超声破碎？

4楼2013-12-09 03:08:53

荞麦tao

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137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-12-12 09:59:39

引用回帖:

4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-09 03:08:53
沉淀里包括包涵体和未破碎的菌体，在上样buffer的作用下，细菌会被裂解。如果完全是包涵体，杂带会很少。我看你的上清里面蛋白不多而沉淀里带比较多，说明破碎效果不好。需要调整一下破碎条件。你是做的超声破碎？

我是用超声波破碎的，5min。谢谢你的回复了

5楼2013-12-11 14:48:54