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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助：完整阅读框克隆表达引物设计加酶切位点和保护碱基。
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anna87

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助：完整阅读框克隆表达引物设计加酶切位点和保护碱基。 已有1人参与

做一个完整阅读框的表达  引物设计如下  不知可以否？pET-28a载体
保护碱基-酶切位点-引物序列：F:CGC-G GATC C- A TGA GGA TGA GTG ATG       (加BamHI)
                                            R:CCG-G AATT C- TTA TTG CTT AAG TGT TCG     (加EcoRI)
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1楼 2013-12-06 13:04:41
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是可以的，克隆进pET28a不会发生移码突变
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-12-06 14:33:16
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anna87

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-06 14:33:16
是可以的，克隆进pET28a不会发生移码突变

为什么没加酶切位点时可以p出产物，加酶切位点和保护碱基后没有条带呢？
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3楼2013-12-11 10:23:56
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jyhln2014

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我现在想请教下您，设计加保护碱基的酶切位点时，有什么需要注意的没？是将自己的目的片段全长全部插进去吗？不胜感激
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4楼2015-06-18 15:56:14
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