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找到一对细菌的通用引物,大家看下为什么会有简并碱基
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永远一片天
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找到一对细菌的通用引物,大家看下为什么会有简并碱基
引物里面有简并碱基到底是好呢,还是不好,求解答GAGAGTTTGATCCTGGCTCAG 和GWATTACCGCGGCKGCTG位置是27到561左右,这样的引物据说是灵敏性高,可以检测出细菌,我做的实验目的不是测序,只要证明样本里面有细菌就行了,求高手解答,这样的引物可以吗?
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引物设计时总是发生严重错配怎么办?敬请大家指点!
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1楼
2013-12-03 17:57:31
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8楼
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Originally posted by
永远一片天
at 2013-12-03 20:06:41
那7F:5’-AGAGTTTGATCCATGGCTCAG-3’;1541R:5’-AAGGAGGTGATCCAGCC-3’这对引物,在一般条件下是不是不一定能扩增出细菌的16SrRNA?那也就不一定证明样本中有细菌了,是这样的吗?一定要回一下哦~谢谢啦...
如果只为了说明有菌,可做无菌检验
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10楼
2013-12-03 20:27:26
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永远一片天: 金币+3,
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很有帮助
2013-12-03 19:00:36
gyesang: 金币+2, 鼓励交流!
2013-12-03 20:22:33
7F:5’-AGAGTTTGATCCATGGCTCAG-3’;1541R:5’-AAGGAGGTGATCCAGCC-3’
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2013-12-03 18:13:19
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2楼
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lm2570
at 2013-12-03 18:13:19
7F:5’-AGAGTTTGATCCATGGCTCAG-3’;1541R:5’-AAGGAGGTGATCCAGCC-3’
这样产物长度会不会太长,1500bp左右,一般的酶好像活性都不够的,我怕扩不出来。
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3楼
2013-12-03 19:00:18
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3楼
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永远一片天
at 2013-12-03 19:00:18
这样产物长度会不会太长,1500bp左右,一般的酶好像活性都不够的,我怕扩不出来。...
没问题的,我做过很多次,前一个是27F ,刚才打掉了一个字
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永远一片天
4楼
2013-12-03 19:20:38
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