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penglu7006

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 上游引物和下游引物的碱基数目要一样多么?

文献的一个基因的上游和下游引物 碱基数目不一样额,大神认为这个可以有么?

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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励应助 2012-12-19 17:26:40
碱基数目没必要一样,只要退火温度接近,不形成hetero dimer就可以了。你的这一对虽然有6个碱基反向互补,不过是接近5'区的,如果不是想做定量PCR的话,应该还可以。
2楼2012-12-19 08:39:06
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追梦的人1987

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不用,二者的温度相差不是太大就行,最好Tm相差小于5度,引物间不要形成二聚体
3楼2012-12-19 09:03:35
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望海思月

铜虫 (小有名气)

不用的
4楼2012-12-19 16:33:03
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静安jingan

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以不一样多啊,数目木有关系的,退火温度才是最重要的啦
让复杂的事情变简单,简单的事情更简单
5楼2012-12-19 17:02:43
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zyy4581

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没必要一样多……

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
6楼2012-12-19 17:49:46
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