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ysn5048

银虫 (小有名气)

[求助] PCR上下游引物TM值相差一般多少

请问大家PCR上下游引物TM值相差一般多少?
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有时候,一句话,可以改变未来
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

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ysn5048: 金币+1, 有帮助 2012-09-04 20:27:17
一般最好不能超过5度
keepon
2楼2012-09-04 11:11:35
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ysn5048

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-09-04 11:11:35
一般最好不能超过5度

我一共设定了两对引物,有一个差距为6.9,这个PCR成功的几率大不大?
有时候,一句话,可以改变未来
3楼2012-09-04 11:16:40
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hlwnxfd2011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


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ysn5048: 金币+1, 有帮助 2012-09-04 20:27:48
一般相差两度,温度相差不要太多。我觉得你可以试试,说不定就P出来了。
4楼2012-09-04 17:01:34
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖


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ysn5048: 金币+1 2012-09-04 20:26:54
理论上是不能相差太大,但是我觉得其他参数设计好还是可以P出来的!
持之以恒、永不放弃!
5楼2012-09-04 19:03:02
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-09-04 11:11:35
一般最好不能超过5度

我觉得你还是增减点碱基让这两个引物的Tm值不要超过5,最后就相差1、2度最好。。。这样P出来的可能性大点。。。
keepon
6楼2012-09-04 21:04:03
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