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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR上下游引物TM值相差一般多少
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ysn5048

银虫 (小有名气)

[求助] PCR上下游引物TM值相差一般多少

请问大家PCR上下游引物TM值相差一般多少？
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有时候，一句话，可以改变未来
1楼 2012-09-04 10:59:23
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
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ysn5048: 金币+1, ★有帮助 2012-09-04 20:27:17
一般最好不能超过5度
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keepon
2楼2012-09-04 11:11:35
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ysn5048

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-09-04 11:11:35
一般最好不能超过5度

我一共设定了两对引物，有一个差距为6.9，这个PCR成功的几率大不大?
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有时候，一句话，可以改变未来
3楼2012-09-04 11:16:40
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hlwnxfd2011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
ysn5048: 金币+1, ★有帮助 2012-09-04 20:27:48
一般相差两度，温度相差不要太多。我觉得你可以试试，说不定就P出来了。
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4楼2012-09-04 17:01:34
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gwd0312

木虫 (正式写手)

“无冕之王”

【答案】应助回帖

★
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ysn5048: 金币+1 2012-09-04 20:26:54
理论上是不能相差太大，但是我觉得其他参数设计好还是可以P出来的！
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持之以恒、永不放弃！
5楼2012-09-04 19:03:02
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zhlf1989513

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zhlf1989513 at 2012-09-04 11:11:35
一般最好不能超过5度

我觉得你还是增减点碱基让这两个引物的Tm值不要超过5，最后就相差1、2度最好。。。这样P出来的可能性大点。。。
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keepon
6楼2012-09-04 21:04:03
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