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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 两个引物只是3‘ 有两个碱基的差异，PCR能否增出特异条带
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yucheng9255

木虫 (著名写手)

[交流] 两个引物只是3‘ 有两个碱基的差异，PCR能否增出特异条带

两个引物只是3‘ 有两个碱基的差异，PCR能否增出特异条带？ 因为是一个突变基因，跟另一个基因只有两个碱基的差异，所以就把引物的3'端放在 突变的两个碱基上， 其他的碱基两个引物都一致，PCR克隆出来能否出来特异基因，另外PCR时有什么注意事项吗？望指点
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1楼 2011-05-01 09:10:38
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cst66276

银虫 (初入文坛)
★
yucheng9255(金币+1):谢谢参与
在看过的一篇文章里，就是这样区分SNP位点的。
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3楼2011-05-01 10:22:39
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zycly86

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖应助。 2011-05-01 20:01:43
lstt09nk(金币+3): 感谢参与 2011-05-06 18:10:39
http://www.lw23.com/pdf_7988b2c0 ... 255c368f/lunwen.pdf

http://webpages.icav.up.pt/PTDC/ ... %20NuclAcidsRes.pdf
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4楼2011-05-01 10:47:41
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地主的小长工

铜虫 (小有名气)
★
yucheng9255(金币+1):谢谢参与
PCR是魔鬼，我觉得这个不好说，只有P过才知道，退火温度好点，可能会好点吧…想问一下，这两个产物的大小也是一样得吗？如果不一样那还能分清呢
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5楼2011-05-01 14:08:32
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zycly86

铜虫 (小有名气)
产物测序一下不就行了吗？
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6楼2011-05-01 16:43:06
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gagalady

新虫 (正式写手)
★
yucheng9255(金币+1):谢谢参与
引物的3‘端有不配对的碱基，够呛能P出来，3’端的5个碱基最好完全配对，
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7楼2011-05-01 16:48:18
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charster

新虫 (小有名气)
3' 的最后3个碱基，如果有两个不匹配，PCR效率就很低了
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8楼2011-05-01 16:50:06
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
yucheng9255(金币+1):谢谢参与
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-05-06 18:11:05
既然是两个基因，分开两个pcr 单独测序看一下就知道了。  不知道我理解的对不对。
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9楼2011-05-01 17:56:57
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yucheng9255

木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by yixuanwin at 2011-05-01 17:56:57:
既然是两个基因，分开两个pcr 单独测序看一下就知道了。  不知道我理解的对不对。

我是这么想的
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10楼2011-05-01 23:37:22
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呆米11

金虫 (小有名气)
★
yucheng9255(金币+1):谢谢参与
能P出来的可能性极小！
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11楼2011-05-06 09:02:28
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haitian0625

金虫 (小有名气)
★
yucheng9255(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
Originally posted by cst66276 at 2011-05-01 10:22:39:
在看过的一篇文章里，就是这样区分SNP位点的。

嗯，我也见到过将引物设计在突变点鉴定SNP的
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12楼2011-05-08 10:40:42
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zhhard

铜虫 (初入文坛)
★
yucheng9255(金币+1):谢谢参与
等位基因特异性PCR？
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13楼2011-12-11 22:29:36
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Echo0508

新虫 (初入文坛)
★
yucheng9255(金币+1): 谢谢参与
我也遇到了和楼主一样的问题，不知道你的实验成功了没？求指点，谢谢~
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14楼2012-11-19 14:55:36
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gcworm

木虫 (职业作家)
路过，帮你顶一下
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15楼2012-11-19 17:25:48
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简单回复
6105098082楼
2011-05-01 09:38   回复  
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