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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 两个引物只是3‘ 有两个碱基的差异，PCR能否增出特异条带
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yucheng9255

木虫 (著名写手)

[交流] 两个引物只是3‘ 有两个碱基的差异，PCR能否增出特异条带

两个引物只是3‘ 有两个碱基的差异，PCR能否增出特异条带？ 因为是一个突变基因，跟另一个基因只有两个碱基的差异，所以就把引物的3'端放在 突变的两个碱基上， 其他的碱基两个引物都一致，PCR克隆出来能否出来特异基因，另外PCR时有什么注意事项吗？望指点
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1楼 2011-05-01 09:10:38
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gagalady

新虫 (正式写手)
★
yucheng9255(金币+1):谢谢参与
引物的3‘端有不配对的碱基，够呛能P出来，3’端的5个碱基最好完全配对，
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7楼2011-05-01 16:48:18
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cst66276

银虫 (初入文坛)
★
yucheng9255(金币+1):谢谢参与
在看过的一篇文章里，就是这样区分SNP位点的。
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3楼2011-05-01 10:22:39
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zycly86

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖应助。 2011-05-01 20:01:43
lstt09nk(金币+3): 感谢参与 2011-05-06 18:10:39
http://www.lw23.com/pdf_7988b2c0 ... 255c368f/lunwen.pdf

http://webpages.icav.up.pt/PTDC/ ... %20NuclAcidsRes.pdf
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4楼2011-05-01 10:47:41
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地主的小长工

铜虫 (小有名气)
★
yucheng9255(金币+1):谢谢参与
PCR是魔鬼，我觉得这个不好说，只有P过才知道，退火温度好点，可能会好点吧…想问一下，这两个产物的大小也是一样得吗？如果不一样那还能分清呢
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5楼2011-05-01 14:08:32
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