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表达载体和目的片段链接问题 已有3人参与
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载体是用的puc18目的片段式未知的（细菌基因组经sau3AI酶切的）要求片段大小是4-10kb的，链接是4度48H 链接体系是10ul T4ligase 5xbuffer 链接后电转用的感受态是大肠杆菌knabc一个耐盐缺陷株，电转电压时2500v 时间是4-5ms,但是板上就是没有阳性菌落，求给点建议，做了3个月了还没有进展 |
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